重组腺病毒CD82KAI1对小鼠子宫基质细胞内α5,β3,MMP-9,E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响.docVIP

基金项目：国家自然科学基金 The National Natural Science Foundation of China 作者简介：尉晓蔚（1983-），女，山东省青岛人，硕士研究生，主要从事胚胎着床方面的研究。电话E-mail： HYPERLINK mailto:angelwei2003@163.com angelwei2003@163.com 通讯作者：谭毅，电话（023E-mail： HYPERLINK mailto:tanyee66@ tanyee66@ 收稿日期： 修回日期： 重组腺病毒CD82/KAI1对小鼠子宫基质细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响 尉晓蔚1 张倩1 谭冬梅1 赵邦霞1 何通川2 谭 毅1 (1重庆医科大学实验动物中心；2 美国芝加哥大学分子肿瘤实验室；重庆，400016；) 摘要：目的 研究CD82/KAI1对着床窗口期小鼠子宫基质细胞内整合素α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。方法 1.采用基因工程技术，构建CD82/KAI1腺病毒。2.用免疫细胞化学技术观察妊娠小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后，细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果 1.构建的小鼠重组腺病毒的滴度达到6.5×1012 pfu/ml，感染原代培养的小鼠子宫基质细胞48小时后，有CD82/KAI1蛋白的明显表达。2.妊娠d4的小鼠子宫基质细胞中E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9均有表达，没有检测到β3的表达。未妊娠组细胞中E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9和β3均没有检测到表达。 3.妊娠d4的小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后，β-catenin和MMP-9表达上升，α5表达下降，E-cadherin的表达量没有变化，依然没有检测到β3的表达。结论 1.成功构建含小鼠CD82/KAI1全基因的重组腺病毒。2. 胚胎植入前小鼠子宫基质细胞内整合素α5、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达可能受CD82/KAI1的影响。 关键词：CD82/KAI1基因；重组腺病毒；子宫基质细胞；原代培养； 中图分类号： Q492 文献标识码：A 文章编号： The Effect of CD82/KAI1 on the Expression of Integrin α5、β3、MMP-9、E-cadherin and β-catenin in Uterine Stromal Cells in Mice WEI Xiao-Wei1, Zhang Qian1, TAN Dong-Mei1, ZHAO Bang-Xia1, HE Tong-Chuan2, TAN Yi1 (1 Laboratory Animal Center, Chongqing Medical University; 2 Molecular tumor laboratory, Chicago University; Chongqing 400016, China) Abstract: Objective Uterine stromal cells were extracted from pregnant mice and cultured in vitro. Then we examined the effect of CD82/KAI1 on integrin α5、β3、MMP-9、E-cadherin and β-catenin in cells. Methods 1. The recombinant adenovirus containing mouse CD82/KAI1 gene was constructed.2.Protein expression of integrin α5, β3, MMP-9, E-cadherin and β-catenin were detected by immunocytochemistry in uterine stromal cells ,which were infected with CD82/KAI1 adenovirus or not. Results 1.The titer of mouse CD82/KAI1 gene recombinant adenovirus vector can ach