MTT法测定乳酸菌活菌数的研究.pptVIP

MTT法测定乳酸菌活菌数的研究;一、研究目的;二、研究原理;三、实验材料与方法;（2）MTT溶液配制：称取100 mg MTT (Amresco 分装)于小烧杯中。加20 mL PBS(0.0l mol/L， pH=7.2)，使其充分溶解，用0.22 μm微孔过滤除菌，分装于1.5 mL的EP管中，4℃避光保存。两周内使用，时间过长，溶液中易进微生物起反应，改变MTT溶液的浓度。 （3）PBS溶液配制（用于溶解MTT）：8 g氯化钠，1.15 g磷酸氢二钾，0.2 g磷酸二氢钾去离子水定容至1 000 mL，用精密pH计调节pH=7.2，溶液浓度为0.01 mol/L。121℃灭菌15 min，室温保存。;（4）PBS溶液配制（用于稀释菌液）：8.5 g氯化 钠，0.2 g氯化钾，2.85 g磷酸氢二钠，0.27 g磷酸二氢钾，去离子水定容至1 000 mL，pH值调至7.0，121℃ 灭菌15 min，室温保存。 （5）培养液的配制：保加利亚乳杆菌用液体 MRS培养，嗜热链球菌用M17+1.5%乳糖培养。 ;3 、 设备 BID-RAD 680全自动酶标仪：日本；HVE-50高温高压灭菌锅：HIRAYAMA，日本；DHP-9272电热恒温培养箱：上海一恒科技有限公司；VD-1320洁净工作台：北京东联哈尔滨仪器制造有限公司；METTLER-TOLEDO320pH