吉富罗非鱼hl lpl基因克隆中及饲料胆碱和脂肪水平 投饲频率和投喂水平对其在肝脏中说表达的影响.docxVIP

功能结构表明，吉富罗非鱼和其他鱼类HL基因氨基酸序列中均存在脂质结合位 功能结构表明，吉富罗非鱼和其他鱼类HL基因氨基酸序列中均存在脂质结合位 点、N．糖基化位点、保守的半胱氨酸位点和催化位点。HL的蛋白质的二级结构 分析显示，无规则卷曲蛋白质结构为主，洳螺旋和延伸带散布于整个蛋白中。 3．LPL基因全长编码区序列片段的克隆。测序结果显示吉富罗非鱼LPL基 因包含全长编码区片段大小为2300bp，其中5’非翻译区(5’．UTR)为126bp，3’ 非翻译区(3’-UTR)为629bp，开放阅读框(ORF)为1545bp，编码515个氨基 酸，蛋白质分子量为5．813596kD。 4．LPL基因生物信息学分析。LPL基因的序列同源性及系统进化分析，发现 吉富罗非鱼LPL氨基酸序列与哺乳动物同源性为56．12％～56．54％，与鸡同源性 为57．35％，与真骨鱼斑马鱼、鳜鱼、大口黑鲈等同源性为67．51％～92．31％，表 明LPL在进化中相对保守。其中吉富罗非鱼与鳜鱼LPL氨基酸序列同源性最低， 为67．51％，与大口黑鲈同源性最高，达到92．31％。通过相关软件进行氨基酸序 列对比，结果显示本研究克隆的吉富罗非鱼肝脏LPL氨基酸与其他物种相比， 具有很强的保守性，从中可以证明，本研究克隆得到的正是吉富罗非鱼的LPL 基因。应用MEGA3．1软件N．J方法构建系统发育树结果显示真鲷