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牛皮肤成纤维细胞体外培养系统的建立
DOI :10.16863/j.cnki .1003 -6377.2005.02.008
2005 6 2 (127 ) ()
牛皮肤成纤维细胞体外培养系统的建立
1.2 3 1, 3 1, 3
王端明 , 易 中, 海里且木 , 陈静波
(1., 830000;
2., 830052;
3., 830000)
:本研究用组织块培养法和冷消化培养法对牛皮肤成 维细胞进行原代培养和传代培养, 并探讨了传代
的方法, 结果表明建立的方法可用于牛皮肤成 维细胞的建系。
:牛;皮肤成 维细胞;细胞系
:S814.8 :A :1003-6377(2005)02-0022-03
[1] [2] [ 3] [4] [5] 0.5 ～ 1mm3 , 2 ～
、 、 、
, 3mlHank` , = 1.
。“”, , 5mm 50ml ,
、, 。 Hank` , 5ml 200IU/ml
[ 6]
Hank` , , Hank
, , , ` 3 , Hank` 2 10%NCS
。 DMEM, ,
, , , 25ml , ,
, 0.5cm, 20 , ,
。 , , 3～ 5ml , 5%CO
2
, 38.5 ℃。 3～ 4h ,
。 , , ,
, 。 。 3d , 48～ 72h 1
1 , 。
1.1 试 剂 1.3.2 ,
DMEM Hyclone , Hank` , 2ml 0.25%
Sig ma , (NCS), 0.02%EDTA 1:1 ,
Nunc 。 4 ℃ 12 ～ 18h , 100×g 5min, ,
1.2 皮肤组织取样 5ml 10%NCS DMEM,
[7]
、 ,
2 25ml , 38.5 ℃5%CO2
1×1.52cm 。 , ,
, 75% 1min, 400I U/ml , 6 ～ 10h ,
Hank` 3 ～ 5 , 200I U/ml 10%NCS DMEM, 48 ～ 72h 1 ,
Hank` , 。 。
1.3 培养方法 1.3.3
1.3.1 90%, 。
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