第二章蛋号白质3.pptVIP

沉淀作用（教材P61） 沉淀作用（教材P61） 沉淀作用（教材P61） 沉淀作用（教材P61-62） 沉淀作用（教材P62-63） 沉淀作用（教材P62-63） 沉淀作用（教材P62-63） 变性作用（教材P62） 变性作用（教材P64） 变性作用的意义（教材P64） 颜色反应（教材P66） 蛋白质的提取分离（教材P66） 小结 练习 1、指出肽键结构 A、—CONH— B、—CH2NH— C、—CH2NH2 D、—CHOHNH— 2、如要使酪蛋白向电场中的阳极移动，溶液PH值应该 A、大于4.6 B、小于4.6 C、等于4.6 D、不明确 3、鸡蛋煮熟后，蛋白质发生变性，这是由于高温破坏了蛋白质的 A、肽键 B、肽链 C、氨基酸 D、空间结构 练习 4、下列物质不能使蛋白质变性的是 A、AgNO3 B、C2H5OH C、HNO3 D、KCl 5、鉴定某溶液是否为含苯环的蛋白质，可选用的试剂为 A、碘　 　B、三氯化铁　 C、浓硝酸　 D、浓溴水 6、双缩脲法测定蛋白质含量所用的检测波长为 A、595nm　 　B、540nm　 C、660nm　 D、280nm 7、米伦反应适用于什么蛋白质 A、有2个以上肽键的 　B、苯基　 C、酚基　 D、吲哚基 8、下列哪个反应专门检测含色氨酸的蛋白质 A、茚三酮反应 　B、黄色反应　 C、米伦反应　 D、乙醛酸反应 项目二 蛋白质的检测 学习目标 熟悉蛋白质变性作用 熟悉蛋白质的颜色反应 了解蛋白质的制备方法 熟悉蛋白质沉淀作用（二） 课前复习 蛋白质与氨基酸的关系 蛋白质一、二级结构 蛋白质相对分子量 蛋白质的两性解离及等电点 蛋白质胶体性质 蛋白质沉淀作用 蛋白质胶体溶液的稳定性决定于其颗粒表面的水化膜和电荷，当这 两个因素遭到破坏后，蛋白质溶液就失去稳定性，并发生凝聚作用， 沉淀析出，这种作用称为蛋白质的沉淀作用。 怎样破坏表面电荷和水化膜呢？ 将溶液pH值调至等电点——亲水性胶体处于不稳定的胶体状态 加入脱水剂——脱去蛋白质表面的水膜 意义 分离制备有活性的天然蛋白制品 从制品中除去杂蛋白，或制备失去活性的蛋白制品 中性盐沉淀（盐析法）——2 水溶性有机溶剂——2（水主，电次） 重金属盐——1（电） 生物碱试剂——1（电） 热凝固沉淀——2 盐析：在蛋白质的水溶液中，加入大量高浓度的强电解质盐如硫酸胺、氯化钠、硫酸钠等，使蛋白质从溶液中析出，称为蛋白质的盐析。 盐析的机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。 盐析法是最常用的蛋白质沉淀方法，该方法不会使蛋白质产生变性。 不同的蛋白质产生沉淀所需要的盐的浓度不一样 用不同的盐浓度把几类混合在一起的蛋白质分段沉淀析出而加以分离 ——分段沉淀 2.有机溶剂沉淀法：在蛋白质溶液中，加入能与水互溶的有机溶剂如乙醇、丙酮等，蛋白质产生沉淀。 有机溶剂沉淀法的机理：破坏蛋白质的水化膜。 有机溶液沉淀蛋白质通常在低温条件下进行，否则有机溶剂与水互溶产生的溶解热会使蛋白质产生变性。 3.重金属盐沉淀（条件：pH 稍大于pI为宜）：在蛋白质溶液中加入重金属盐溶液，会使蛋白质沉淀。 重金属沉淀法的机理：重金属盐加入之后，与带负电的羧基结合。 重金属沉淀蛋白质会使蛋白质产生变性，长期从事重金属作业的人应多吃高蛋白食品，以防止重金属离子被机体吸收后造成对机体的损害。 4.生物碱试剂沉淀法（条件：pH稍小于pI） 生物碱是植物组织中具有显著生理作用的一类含氮的碱性物质。能够沉淀生物碱的试剂称为生物碱试剂。生物碱试剂一般为弱酸性物质，如单宁酸、苦味酸、三氯乙酸等。 生物碱试剂沉淀蛋白质的机理：在酸性条件下，蛋白质带正电，可以与生物碱试剂的酸根离子结合而产生沉淀。 低浓度的盐溶液加入蛋白质溶液中，会导致蛋白质的溶解度增加，该现象称为盐溶。 5.热凝固沉淀：蛋白质受热后，在有少量的盐类存在或将pH 调至等电点，则很容易发生凝固沉淀。 热凝固沉淀机理：破坏蛋白质表面净电荷。 中性盐沉淀（盐析法）——2 水溶性有机溶剂——2（水主，电次） 重金属盐——1（电） 生物碱试剂——1（电） 热凝固沉淀——2 可逆沉淀 不可逆沉淀 中性盐沉淀（盐析法）——制备酶 水溶性有机