三聚氰胺培训课件.ppt

三聚氰胺检测 质量部 化验室 2017年 三聚氰胺代表案例 2008年，很多食用三鹿集团生产的奶粉的婴儿被发现患有肾结石，随后在其奶粉中被发现化工原料三聚氰胺。根据公布数字，截至2008年9月21日，因使用婴幼儿奶粉而接受门诊治疗咨询且已康复的婴幼儿累计39,965人，正在住院的有12,892人，此前已治愈出院1,579人，死亡4人，另截至到9月25日，香港有5个人、澳门有1人确诊患病。事件引起各国的高度关注和对乳制品安全的担忧。 2009年1月22日，河北省石家庄市中级人民法院一审宣判，三鹿前董事长田文华被判处无期徒刑，三鹿集团高层管理人员王玉良、杭志奇、吴聚生则分别被判有期徒刑15年、8年及5年。三鹿集团作为单位被告，犯了生产、销售伪劣产品罪，被判处罚款人民币4937余万元。涉嫌制造和销售含三聚氰胺的奶农张玉军、高俊杰及耿金平三人被判处死刑，薛建忠无期徒刑，张彦军有期徒刑15年，耿金珠有期徒刑8年，萧玉有期徒刑5年。 三鹿为什么使用三聚氰胺？ 三聚氰胺的结构 化学名：三聚氰胺 分子式：C3H6N6 分子量：126.15 俗称：密胺、蛋白精 在食品制作需要检查蛋白质含量，但是直接检测蛋白质含量技术比较复杂，所以业内常常使用“凯氏定氮法” ，通过食品中氮原子的含量来间接推算出蛋白质含量。 也就是说，食品中氮原子的含量越高，蛋白质含量也就越高。因此三聚氰胺被派上大用场。 三聚氰胺检测方法 参照GB/T 22388 –2008 方法一高效液相色谱法(HPLC) 1、实验原理 样品前处理 1、提取 2、净化 三聚氰胺的性质 化学性质 .酸性条件下，三聚氰胺因其化学结构中特殊的3个伯氨基团而较易质子化形成正离子，即弱阳离子化合物。 三氯乙酸的作用 1.具有沉淀蛋白质的作用，常用作蛋白基质样品中三聚氰胺的提取。 固相萃取柱 固相萃取柱（SPE）基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化。SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。 混合型阳离子交换固相萃取柱 混合型阳离子交换固相萃取柱是将磺酸基团键合在极性高聚物聚苯乙烯-二乙烯苯吸附剂上，具有离子交换和反向吸附两种机理。 5%氨化甲醇洗脱 氨化甲醇溶液，碱性，使三聚氰胺呈中性，与磺酸基分离，以便甲醇分离。 水和甲醇的淋洗 水和甲醇的淋洗可以去除样品中的水溶性杂质、无机盐和非离子的脂溶性杂质。 3、液相色谱条件 离子对缓冲溶液 三聚氰胺是强极性化合物，在传统的反相C18柱中保留很差，不能得到较好的分离，离子对试剂使用的目的是使三聚氰胺在HPLC中有较好的分离。 4、标准曲线的绘制 用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释到1、2、5、10、20、40ug/ml的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。 5、结果计算 6、方法的检测限与定量限 检测限与定量限 检测限（LOD, limit of detection）又称为检出限，指由基质空白所产生的仪器背景信号的3倍值的相应量，或者以基质空白产生的背景信号平均值加上3倍的均数标准差。是方法（方法检测限MDL）和仪器（仪器检测限IDL）灵敏度体现的重要指标之一。 检测限与定量限 定量限（ LOQ，Limit of Quantity? ）是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度。定量限体现了分析方法是否具备灵敏的定量检测能力。杂质定量试验，需考察方法的定量限，以保证含量很少的杂质能够被准确测出。 检测限与定量限的区别 3倍信噪比是检出限10倍信噪比是定量限可以简单的这样来理解，检出限是方法能测出该物质时的最低浓度。定量限是方法能准确定量出该物质时最低的浓度。 7、回收率 8、注意事项 溶剂前处理-过滤：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液。 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡（一定打开排液阀，再按Purge键，否则很容易把色谱柱冲塌陷。 ）。 气泡对测定的影响：①泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积；②柱中气泡使流动相绕流，峰变形；③检测器中的气泡产生基线波动。