Fas靶向RNA干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定.PDFVIP

第 卷第 期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) 26 2 Vol.26No.2 年 月 ( ) 2005 4 JournalofXianJiaoton Universit MedicalSciences A r.2005 g y p 靶向 干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定 Fas RNA 1 1 2 1 1 1 刘苏虎 ,张王刚 ,张 镁 ,朱 青 ,田 玮 ,孙静昕 (西安交通大学第二医院: 血液科; 病理科,陕西西安 ) 1. 2. 710004 摘要:目的 构建 靶向的 干扰质粒载体,为探讨抑制 表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基 Fas RNA Fas 础。方法 法获得 启动子序列以及产生 的相应 模板序列,将其克隆入改造后的 ,获 PCR U6 siRNA DNA cDNA3.1 p 得 干扰载体 。脂质体法将 导入 细胞,免疫组化法检测对 细胞 表达的抑制 RNA U6-siFas U6-siFas P815 P815 Fas p p 情况。结果 所构建的载体 能够干扰 细胞中 的表达,并且具有新霉素抗性,能够用 筛选 U6-siFas P815 Fas G-418 p 稳定转化的细胞株。结论 成功构建了抑制小鼠 表达的 干扰质粒载体。 Fas RNA 关键词: 蛋白; 干扰;质粒;载体构建 Fas RNA 中图分类号: 文献标识码: ( ) R734 A 1671-8259200502-0115-04 TheconstructionandidentificationofFas-taretin g g