实验5-琥珀酸脱题氢酶alt.pptVIP

* 琥珀酸脱氢酶的作用 及其竞争性抑制 生物化学与分子生物学系 陈园园 实 验 7 了解琥珀酸脱氢酶的作用及 酶促反应中的竞争性抑制作用 实 验 目 的 竞争性抑制作用 抑制剂和底物的结构相似， 能和酶的底物分子竞争 与酶的活性中心相结合， 从而阻碍酶与底物结合 形成中间产物。 酶活性位点 抑制程度取决于抑制剂和底物对酶的相对亲和力 以及抑制剂和底物浓度比。 加大底物浓度可减弱甚至解除抑制作用。 实 验 原 理 延胡索酸 琥珀酸 还原型甲烯蓝 (白) 琥珀酸脱氢酶 甲烯蓝 (蓝) E + S ES E + P 琥珀酸 丙二酸 E + I EI 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 操 作 步 骤 1、酶提取液的制备 　 1~1.3 g 兔肌肉(剪碎)＋海砂少许(1/3匙) 　 +2ml 磷酸盐缓冲液(1/15 mol/L)，研磨成糊状， 然后再加10ml 磷酸盐缓冲液(1/15 mol/L)混匀。 2、纱布过滤（双层） 3、取小试管五只，按书上P40表格加入各试剂。 最后加石蜡隔绝空气，37℃水浴保温。 每间隔10~15min观察一次结果，并记录。 实 验 结 果 结果 - +++ + +++ -