第十五章甾特体激素类药物的分析.pptVIP

第十五章 甾体激素类药物的分析 （2）方法 对照品法 55 ℃ 异烟肼 挥去乙醇 对照液 供试液 A 暗45′ （3）讨论 反应速度（反应专属性） A. C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 反应专属性 C3－酮基 B. 溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水甲醇 无水乙醇 甾酮类激素药物 呈色 羰基试剂 2.C3–酮基和C20–酮基 ＃常用的羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼 具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物 呈色 亚硝基铁氰化纳 间二硝基酚 芳香醛 3.甲酮基 黄体酮 蓝紫色 亚硝基铁 氰化纳 其他甾体 淡橙色不显色 有机氟 Fˉ 有机破坏 有机氯 Clˉ 4.有机卤素 茜素氟蓝 硝酸亚铈 硝酸—硝酸银 AgCl↓ 呈色 雌激素类药物 红色偶 氮染料 重氮苯磺酸 5. 酚羟基 含炔基的甾体激素 银盐沉淀 硝酸银 6. 乙炔基的沉淀反应 ↓ (三)制备衍生物测定m.p. 盐酸氨基脲 苯丙酸诺龙 △ 缩氨基脲衍生物 1. 缩氨基脲的生成 m.p.约180℃（分解） 2. 酯的水解 丙酸睾酮 碱性条件 睾酮 m.p.为150℃~ 156℃ △４-3-酮、苯环、其他共轭结构 （四）UV法 1. 结构依据 240nm左右 280nm左右 2. 示例 曲安西龙 丙酸倍氯米松 溶剂 甲醇 乙醇 20μg/ml 浓度 20μg/ml 结果判断 在238nm处有最大吸收 在239nm处有最大吸收，A为 0.57～0.60，在239nm与263nm 处的吸收度比值为2.25～2.45 结构特征：酚羟基、C17 –OH C17 –乙炔基 炔雌醇 （五）IR法 1505cm-1 ν 3505cm-1 3300cm-1 ν 1590cm-1 3610cm-1 ν 酚羟基 醇羟基 1615cm-1 苯环的骨架振动 黄体酮 结构特征：△４-3-酮、C17-酮基 1700cm-1 ?C=O 20位酮基 1665cm-1 3位酮基 1615cm-1 870cm-1 ?C-H 双键 （六）TLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别 方法：对照品法 要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。 （七） HPLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏） 方法：对照品法 要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的tR与对照品峰的tR一致。 三、 特殊杂质检查 （一）其他甾体的检查 检查意义：其他甾体与甾体激素药物结 构相似，也有一定的药理作 用而又互不相同. 检查方法（具有一定分离能力） TLC法（高低浓度对比法） HPLC法（类似高低浓度对比法） （1）TLC法（高低浓度对比法） 判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色 例：氢化可的松中其他甾体的检查 供试液：本品+氯仿-甲醇（9：1） 浓度：3.0mg/ml 对照液：供试液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1） 60μg/ml 层析：供试液 点样、展开、斑点检出。  对照液 判断：供试液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜 色与对照液的主斑点比较，不得更深。 （2）HPLC法（主成分自身对照法） 判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积 硒的检查 （二） 来源 合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢 有毒 方法 药物 氧瓶燃烧 二氨基萘比色法测定 （三）有机溶剂残留量的检查 （灵敏度法） 甲醇 不得出峰 检测限= 3.1ng 丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子 以地塞米松磷酸钠为例 GC法 地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮 精密称取本品0.16g，置10ml量瓶 中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至 刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10 μl(≈7.9mg)与丙酮100μl(≈79mg)置 100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml， 加水至刻度，作为对照液。照气相色谱 法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得 出现甲醇峰。 （四）游离磷酸盐的检查 地塞米松磷酸钠 对照品比色法 供试液+钼酸铵+1-