who人类精液名检查与处理实验手册.pptVIP

WHO人类精液检查与处理实验手册 （第五版）修订要点及临床应用 背景 1980年出版第一版“人类精液及精子—宫颈精液实验实检验手册”（生育调节） 1987年出版第二版（生育调节、不育症的诊治） 1992年出版第三版（生育调节、不育症的诊治、环境污染） 1999年出版第四版（男用避孕病、辅助生育技术-ICSI、环境污染） 背景 以往精液分析存在问题： 检测方法不一 结果带有主观性、不客观、不真实 精确度低、重复性差 对男性生育力的评估、临床诊断应用价值很有限 因此，需要一个标准化的手册 2010年出版第五版 随着近年来男科学和生殖医学的快速发展，基于询证医学的证据，不少原有的概念和诊疗建议需要修订； 为此，WHO组织成立了专门的委员会来负责这项工作，编写制订了新一版的手册，以期达到更好的标准化，提高精液分析的质量。 修改WHO人类精液检查手册的目的 提高精液分析各参数的准确性 简化方法，提高可操作性 提供质控结果不良时的应对提示及细节 利于实验室间的标准化 提高精液分析各参数的临床应用价值（结果判断评述） 提高疗效评估的准确性 第5版《手册》提纲 一、精液分析 标准程序：常规分析、抗体包被精子、非精子成分； 可供选择的试验：精子多发性缺陷指数、白细胞免疫细胞化学染色、精子宫颈粘液相互作用、精桨生化、CASA； 研究试验：活性氧、顶体反应、精子卵细胞相互作用作用、精子透明带结合、去透明带仓鼠卵穿透试验、精子染色质检测等。 “精液分析”部分的修订主要涉及： 精子浓度和精子总数的测定； 精子活动力分级； 精子形态学评估； 精液参考值范围。 精子浓度和精子总数的测定 简化精液稀释方法及增加计数池的面积，每份标本均采用两次取样、两次稀释和两次计数，每次计数至少200个精子，且两次计数在95%可信区间内。 一次射精中的精子总数能够提供反映睾丸功能的更为精确的信息，因此，新版手册强调必须精确地测定精液体积。 精液采集和体积测定 根据重量间接计算精液体积，假定精液比重为1g/ml（实际为1.014g/ml)来计算。（首选方法） 1.秤取容器的重量， 2.秤取装有精液的容器的重量， 3.计算重量之差（g=ml) 精子浓度和精子总数的测定 推荐使用改良Neubauer血细胞计数板； 制备两份分别稀释的样本； 不将同一份稀释样本加入到两个计数池中； 不要两次计数同一个数池。 精子数低的样本：不必精确测定时 粗略估计 如果4/ X 400HPF(或16/ X 200HPF)，则说明浓度为“2x106/ml” 存在精子吗？ 取1ml精液，离心300g x 15min;弃上清，留下50∪l液体，取2份10 ∪l沉淀加于载片，分别加盖22mm x 22mm盖片（20 ∪m深）； 观察整个盖片（2 x 480个视野）；如果有精子，则为“隐匿精子症”。 存在活动精子吗？ 将40 ∪l精液置于24mm x 50mm盖片下（33 ∪m深）；观察整个盖片（～1200视野）；如果见到活动精子，则计数有多少。 注意：以上过程并不精确 少的精子=大的计数误差 未见精子≠没有精子存在； 0的95%可信区间上限=3.7 精子活动力检测 精子前向运动的情况与受孕具有密切的关联；新版手册中一个重要的修订是精子活动力的分类方法。 精子活动力的分类 前向运动（Progressive motility,PR) 非前向运动（Non-progressive motility,NP) 不运动（Immotility,IM) 精子形态学：染色方法 推荐采用Papanicolaou、Shorr或Diff-Quik染色法 使用光学显微镜观察，精子头部顶体区为浅蓝色，顶体后区为深蓝色，中段略呈红色，尾部为蓝色或红色。残余的胞浆小滴染成粉红色或橙红色。 精液的参考值范围 新版手册对正常生育男性额精液参考值范围进行了修订。 为了制订参考值范围，采纳了3大洲8个国家的400～1900分最近使女方生育的男性的精液标本的原始数据。 在数据统计方面，由于各项精液参数的高值都不太可能对生育产生危害，所以采用单侧参考值区间，并以第5百分位数作为参考值下限对于精液常规分析参数来说更为合适，而不需要像一般的统计学分析那样采用双侧参考值区间和第2.5百分位数。 新版手册制定的参考值范围 新版手册制订的参考值范围 精液分析参数的临床应用 生育力评估：女方妊娠、妊娠时相 明确不育诊断，寻找病因 其他男性病诊断 治疗策略制定（常规治疗及辅助生殖） 疗效评估 避孕节育效果评估 生育力评估 评估男性生育三大要点： 女方妊娠 妊娠时