温度、激活剂和抑制剂收对酶活力的影响.pptVIP

实验二 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响 一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。 二、实验原理（一）温度对酶活性的影响 人唾液中淀粉酶为α-为淀粉酶，在唾液腺细胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有不同颜色反应，分别呈现为： 蓝色 紫色 褐色 红色棕黄色(遇碘不显色)。 （二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响 酶活力常受到有些物质的影响,有些物质能使酶活力增强,称为酶的激活剂； 另一些物质则能使酶活力降低，称为酶的抑制剂。 三、试剂和器材 1、实验器材 (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表 2、实验试剂 (1) 0.5%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (3) 1% NaCl (4) 1% CuSO4 (5) 1% Na2SO4 (6) 0.1%淀粉溶液 (7) 唾液淀粉酶 四、操作步骤 （一）温度对酶活性的影响 取6支试管，编号，按下表的顺序准确地加入各种试剂，记录结果。 (二) 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 五、注意事项 1、 本实验中的保温时间是5 min-10 min，因不同的唾液淀粉酶的活性是不同的。 2、淀粉溶液与酶液务必充分混匀，反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。 思考题 1、 高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶 的分离纯化中克服这种影响？ 2、 哪些因素可以导致酶活性的降低？ * * * 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最适温度(即酶促反应速度最快时的环境温度) 酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。 剂i] 记录观察结果* 1 1 1 KI-I2液（滴） 1和1E，2和2E…各对应管混和并摇匀后,置各温度保温5-10 min * 各保温10 min 70 37 冰浴 温度（℃） 1.0 1.0 1.0 唾液淀粉酶（mL） 3E 2E 1E 管 号 各保温10 min 70 37 冰浴 温度（℃） 2.0 2.0 2.0 0.5%淀粉的0.3%氯化钠（mL） 3 2 1 管 号 记录结果 1-2滴 1-2滴 1-2滴 1-2滴 KI-I2（滴） 摇匀，置37℃水浴中5~15分钟，取出冷却。 1.0 1.0 1.0 1.0 唾液淀粉酶 1.5 1.5 1.5 1.5 0.1%淀粉（ mL ） — 1.0 — — 1% Na2SO4（ mL） 1.0 — — — 蒸馏水（ mL） — — 1.0 — 1% CuSO4（ mL） — — — 1.0 1% NaCl（mL） 4 3 2 1 试 剂 管 号 剂i] *