第6章酶工程但制药一.pptVIP

第六章 酶工程制药;第一节 概述酶的特性;一、酶工程简介;现代酶工程的研究内容： 1、酶的分离、提纯、大批量生产及新酶和酶的应用开发；2、酶和细胞的固定化及酶反应器的研究；3、酶生产中基因工程技术的应用及遗传修饰酶（突变酶）的研究；4、酶的分子改造与化学修饰、以及酶的结构与功能之间关系的研究；5、有机相中酶反应的研究；6、酶的抑制剂、开发及其应用研究；7、抗体酶、核酸酶的研究；8、模拟酶、合成酶、酶分子的人工设计、合成的研究。 ;二、 酶的来源;三、酶的生产菌;3、常用产酶微生物;;※提高药用酶产量的措施;3、添加表面活性剂 可分为离子型和非离子型，离子型对细胞有毒害作用，只能使用非离子型，可聚集在细胞膜上，增加细胞通透性，有利于酶的分泌，可增加酶的产量。 4、添加刺激剂 在植物细胞培养生产次级代谢产物的过程中，添加某些刺激剂可显著提高次级代谢的物的产量。真菌的细胞壁碎片或其有效成分、微生物胞外酶以及一些小分子物质。 5、添加产酶促进剂 植酸钙镁可使霉菌蛋白酶和橘青霉磷酸二酯酶的产量提高1-20倍。 ;四、酶在医药领域的应用;1、蛋白酶 临床上使用最早、用途最广的药用酶之一。 消化剂，用于治疗消化不良和食欲不振，使用时常常与淀粉酶、脂肪酶等一起制成复合酶制剂，以增加疗效，片剂，可口服。 消炎剂，对各种炎症有很好的疗效，它能分解一些蛋白质和多肽，使炎症部位的坏死组织溶解，增加组织的通透性，抑制浮肿，促进病灶附近组织积液的排出并抑制肉芽的形成，可口服、外敷和肌肉注射。 蛋白酶经组织注射可治疗高血压，由于蛋白酶催化运动迟缓素原及胰血管舒张素原的部分肽段水解生成运动迟缓素和胰血管舒张素，从而使血压下降。;2、α-淀粉酶 消化药。 3、脂肪酶 消化剂。假单胞菌脂肪酶能分解血液中的低密度脂蛋白和乳糜微粒，可用于预防和治疗高血脂病。 4、右旋糖苷酶 水解右旋糖苷生产小分子产物，对龋齿有显著的预防作用，可加到牙膏和嗽口水中。 5、溶菌酶 抗菌、消炎、镇痛作用，作用于细胞壁，使其受到破坏，而使病原菌、腐败性细菌等溶解死亡。;6、超氧化物歧化酶 抗氧化、抗辐射、抗衰老、保护机体的DNA、蛋白质和细胞膜免受超氧负离子的破坏。 对红斑狼疮、皮肤炎、结肠炎、白内障、风湿性关节炎、氧中毒等疾病有显著疗效 对辐射有防护作用。;7、乳糖酶 治疗乳糖缺乏症，有些人或婴儿肠道中缺乏乳糖酶，饮用含有乳糖的牛奶等食品时，由于不能分解乳糖，在肠道中，乳糖会因为细菌分解而产生有机酸，刺激肠道引起呕吐。 8、链激酶 可催化纤维蛋白酶原，激活成纤维蛋白酶，将纤维蛋白水解，使血栓溶解。 9、尿激酶 溶解血栓。;3、在药物生产方面的应用 酶在药物制造方面的应用是利用酶的催化将前体物质转变为药物。 主要应用有：利用青霉素酰化酶制造半合成青霉素和头孢霉素、利用β-酷氨酸酶制造多巴、利用核苷磷酸化酶生产阿糖腺苷、利用蛋白酶和羧肽酶将猪胰岛素转化为人胰岛素等。 4、在分析检测方面的应用 用酶进行物质分析检测的方法统称为酶法检测或酶法分析。 酶法检测可以分为单酶反应、多酶偶联反应和酶标免疫反应等三类。;第二节 酶和细胞的固定化;2、特点：既有生物催化剂的功能，又具有固相催化剂的特性。 优点：（1）可以多次使用，而且在多数情况下，酶的稳定性提高；（2）反应后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量高；（3）反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制；（4）酶的利用效率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量减少；（5）比水溶性酶更适合于多酶反应。 缺点： （1）固定化时，酶活力有损失；（2）增加了生产的成本，工厂初始投资大；（3）只能和于可溶性底物，而且较适于小分子底物，对大分子底物不适宜；（4）胞内酶必须经过酶的分离纯化过程；（5）与完整菌体相比不适宜用于多酶反应，特别是需要辅助因子的反应。;;1. 载体结合法：将酶结合到不溶性载体上的一种固定化方法 物理吸附法：用物理方法将酶吸附于不溶性载体上。优：操作简单，固定化过程与纯化过程同时实验，载体可再生；缺：最适吸附酶量无规律可循，酶易于脱落，导致活力下降并污染产物。 离子结合法：酶通过离子键结合于有离子交换基的水不溶性载体上。优：操作简单，处理条件温和，酶活回收率高；缺：载体与酶的结合力比较弱。 共价结合法：酶以共价键结合于载体上，也就是使酶分子上非活性部位功能团与载体表面活泼基团之间发生化学反应而形成共价键。优：酶与载体结合牢固，稳定性好，不易脱落；缺：反应条件苛刻，操作复杂，酶的损失大，起始投资大。;2. 交联法：用双功能或多功能试剂使酶与酶或微生物的细胞与细胞之间交联。最常用的交联剂是戊二醛。 交联酶法：用多功能试剂使酶分子内或分子间彼此连接成网络结构。 酶—辅助蛋白交联法：在酶溶