级核酸次.ppt

染色体包装的结构模型 多级螺旋模型 压缩倍数 7 6 40 5 （8400） DNA → 核小体 → 螺线管 → 超螺线管 → 染色单体 2nm 10nm 30(10)nm 400nm 2~10μm 一级包装 二级包装 三级包装 四级包装 分子杂交（molecular hybridization） 思考题： 1. 试比较蛋白质与核酸的组成、结构及功能的差异。 2. 一个DNA样品，已知A和G各占30%和20%，试问它可含有若干T和C？该样品的Tm值是多少？ 3. 如果人体每个细胞的DNA含3 ?109碱基对。试问这种DNA分子的总长度为多少？占多大体积？含有多少圈螺旋？ DNA序列测定与RNA序列测定 DNA序列测定与蛋白质的氨基酸序列测定 ●首先，RNA的五碳糖的2′-碳上含有－OH, 在碱性环境中很容易发生水解反应, 很不稳定。 为什么大多数生物的遗传物质是DNA分子？ ●第二, 单链RNA的碱基游离在外部环境中，易受到环境因素的影响; DNA双链的碱基按互补配对原则通过氢键相连, 比RNA结构和化学性质稳定, 更适合作为遗传信息长期储存。 生理条件下DNA比RNA稳定106倍, DNA的磷酸二酯键比蛋白质的肽键抗水解能力高100倍 ●第三, DNA分子中特有的碱基是T, RNA中特有的碱基是U。U与T具有相似的空间结构, 都能与A配对。但C容易与亚硝酸盐反应, 也容易自发地脱氨基而转变为U。如果U是DNA的一个固有的正常碱基, 细胞就无法辨明DNA中的U是自身原有的还是C突变来的。神奇的自然选择过程选择保留了含T而不含U的DNA作为大多数生物的遗传物质。DNA分子中一旦出现U, 则肯定是C脱去氨基转变来的, 能被“系统”相关的酶迅速识别并切除, 从而保证DNA携带的遗传信息相对稳定。 提要 本章主要介绍核酸的化学本质、结构和功能。 总的要求是： 1.了解核酸的化学本质及DNA和RNA在组分、结构和功能上的差异。 2.弄清嘌呤、嘧啶、核苷、核苷酸和核酸在分子结构上的关系。 3.了解核酸的结构和它们的性质、功能的相互关系。认识核酸在生物科学上的重要性及其实践意义。 注意： （1）核苷酸是核酸的基本组成单位，应以腺苷酸和胞苷酸为代表，彻底弄清核苷酸的化学结构和化学性质。结合有机化学把嘌呤和嘧啶的基本结构搞清楚，同时把核酸中存在的A、T、U、C、G的结构记熟。 （2）注意嘌呤、嘧啶同核糖在哪个部位连接成核苷，核苷如何同磷酸连接成核苷酸，核苷酸又如何连接成一级结构的核苷酸链。要特别注意核酸的二、三级结构中碱基的配对规律。 （3）从分析比较核酸分子的组成和结构上的特点，进而联系它们的性质和生物功能。 第七节 核酸的性质 一、一般理化性质 1. 为两性电解质，通常表现为酸性。 2. DNA为白色纤维状固体，RNA为白色粉末； 不溶于有机溶剂。 3. DNA溶液的粘度极高, RNA溶液粘度小得多。 4. RNA能在室温条件下被稀碱水解而DNA对碱 稳定。 利用核糖和脱氧核糖不同的显色反应鉴定DNA与RNA: D- 核糖与酸和苔黑酚共热 → 绿 色(λmax=670nm ) D-2-脱氧核糖与酸和二苯胺→ 蓝紫色(λmax=595nm ) 二、核酸的紫外吸收性质 核酸的碱基具有共轭双键，因而有紫外吸收性质，最大吸收峰在260nm（蛋白质的紫外吸收峰在280nm）。 核酸的光吸收值比其各核苷酸光吸收值的和少30~40%。 当核酸变性或降解时光吸收值显著增加（增色效应）; 但核酸复性后，光吸收值又回复到原有水平（减色效应）。 紫外吸收是实验室最常用的DNA或RNA定量测定方法。 从A260/A280比值可判断核酸样品的纯度： 纯DNA: A260/A280 1.8； 纯RNA: A260/A280≥ 2.0 三、核酸的变性 1. 变性(denaturation)的概念 核酸分子的双螺旋区氢键断裂，空间结构破坏，形成单链无规线团状态，只涉及次级键的破坏。 核酸变性不同