八版第十六章件rna的生物合成.ppt

依赖于ρ因子的转录终止 依赖于ρ因子的终止子也可以形成发夹结构，但是后面没有不依赖ρ的终止子特有的多聚dA序列。 ρ因子先与转录生成的RNA结合，借助水解ATP的能量向前移动，即追赶RNA聚合酶，当转录生成的RNA形成发夹结构时，使ρ因子追赶上RNA聚合酶，导致RNA-DNA之间的结合不稳定，使RNA脱离模板。 依赖于ρ因子的转录终止 四、转录的特点 不对称性 具有方向性 真核生物mRNA的转录后加工修饰 原核生物前体tRNA的转录后加工 原核生物的加工包括5`和3`旁序列的切除和个别碱基的修饰。 真核生物的前体tRNA的转录后加工 原核生物前体rRNA转录后加工 真核生物前体rRNA的转录后加工 四、核酶在转录修饰中的作用 核酶概念的提出：在研究四膜虫时发现，其rRNA能进行自我剪接，在没有蛋白质的情况下，剪接反应仍可完成。因此，将这种具有催化作用的RNA命名为核酶。 其二级结构为槌头结构，这是核酶起作用的结构要求。 生物化学教研室 第十六章 RNA的生物合成(Chapter 16：RNA Biosynthesis） 目的要求 掌握转录的基本概念；转录模板、原核生物RNA聚合酶、模板与酶的辨认结合；原核生物的转录过程。 熟悉真核生物的RNA聚合酶；真核生物的转录过程；真核生物mRNA的录后加工修饰。 了解真核生物tRNA、rRNA的转录后加工。 教学内容 第一节 转录的概况 一、转录的定义及与复制的比较 二、参与转录的物质 第二节 转录过程与特点 一、转录的起始 二、转录的延长 三、转录的终止 四、转录的特点 第三节 转录后的加工修饰 一、真核生物mRNA的转录后加工修饰 二、前体tRNA的转录后加工 三、前体rRNA的转录后加工 四、核酶在转录修饰中的作用 一、转录的定义及与复制的比较 1.转录的定义 以DNA为模板，以四种核糖核苷酸为原料，在RNA聚合酶催化下，合成RNA的过程。 2.转录与复制的比较 二、参与转录的物质 （一）DNA模板 （二）RNA聚合酶 （三）合成RNA的原料 （四）终止因子（ρ因子） （一）模板 三种RNA都是以DNA为模板，RNA聚合酶是以其中的一条链的某一节段为模板，该链称为模板链，另一条链为编码链 。 模板 （二）RNA聚合酶 原核生物RNA聚合酶 由五个亚基构成：?2??’? ?2??’ 构成核心酶，与?因子一起构成全酶 ?因子可帮助辨认转录起始位点。 核心酶催化3’,5’-磷酸二酯键的形成合成RNA。 RNA聚合酶亚单位示意图 原核生物RNA聚合酶亚基的功能 亚基 功 能 ? 识别并结合上游启动子元件，决定哪些基因被转录 ? 含活性中心，催化3’,5’-磷酸二酯键的形成 ?’ 结合DNA模板，解链 ? 协助核心酶识别并结合启动子元件，辨认转录起始位点 ? 未知 （二）RNA聚合酶 真核生物RNA聚合酶 分类 分布 作用 RNA聚合酶Ⅰ(A) 核仁 28S、18S、5.8SrRNA共同前体45SRNA的合成 RNA聚合酶Ⅱ(B) 核质 各种mRNA前体的合成和U1~U13snRNA前体（U6snRNA除外）的合成 RNA聚合酶Ⅲ(C) 核质 各种tRNA、5SrRNA、U6snRNA以及非U族snRNA等前体的合成 真核生物RNA聚合酶与大肠杆菌RNA聚合酶的比较 RNA-polⅡ大亚基CTD结构 真核生物RNA-polⅡ的大亚基蛋白质的C端氨基酸序列为(YSPTSPS，酪丝脯苏丝脯丝)n，不同物种n值不同，是由含羟基氨基酸为主体的重复序列，称为羧基末端结构域（CTD）。 （三）合成RNA的原料 四种核苷三磷酸：ATP、GTP、CTP、UTP 二价金属离子：Mg2+、Mn2+是RNA聚合酶的必需辅助因子。 （四）终止因子（?因子 ） ?因子在特殊的位点上停止RNA的合成，又叫终止蛋白。 一、转录起始 1、启动子 2、原核生物的转录起始 3、真核生物的转录起始 1、启动子 启动子(promoter, P)是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列，位于转录起始点的上游。 不同的启动子启动转录的活性不同，在原核生物和真核生物的启动子序列中都有一些保守序列。 1、启动子 原核生物启动子： -10bp——TATAAT（Pribnow盒） -35bp——TTGACA 真核生物启动子： -25?-30bp——TATA盒（即Hogness盒） -30?-110bp——CAAT盒和GC盒 原核生物启动子 真核生物启动子 2、原核生物的转录起始 RNA聚合酶以全酶形式与双链DNA结合，通过?因子识别模板链并与启动子结合形成复合物，然后进行解链。以四种核苷三磷酸为原料，按碱基配对的原则结合到模板链上，第一个多为ATP。 RNA聚合酶与启动子的结合