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牛蒡叶中绿原酸的提取分离及应用前景 姓名： 张守村 目 录 绿原酸简介 绿原酸提取方法 绿原酸的主要功用 绿原酸的应用 绿原酸化学结构式 绿原酸简介 牛蒡的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1- 羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示 。 半水合物为针状结晶（水）。110 ℃变为无水化合物，熔点 208 ℃， [ α ]24D-35.2 ℃（ c=2.8）。98%绿原酸，25 ℃水中溶解度为 4%，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。 提 取 工 艺 绿原酸的提取工艺正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。 提取方法 回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。 超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。 微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。 提取方法 渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。 煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。 浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。 绿原酸的分离、纯化工艺 将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。 绿原酸的含量测定 精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。 绿原酸的提取工艺对比 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等。 功用：生物活性 绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。 功用：抗菌、抗病毒 绿原酸有较强的抗菌消炎作用，对桃叶珊瑚苷及其多聚体有明显的抑菌作用，桃叶珊瑚苷元对革兰氏阴性、阳性菌都有抑制作用。桃叶珊瑚苷有抑菌、利尿作用，并能促进伤口愈合；桃叶珊瑚苷与葡萄糖苷一起预培养后还会产生明显的抗病毒作用，但其本身开不具有抗病毒功能。日本爱知医科大学加龄医科学研究所经研究确认，从杜仲中提取的碱性物质有抗破坏人体免疫系统病毒的功能，这种物质有可能用于预防和治疗艾滋病。 功用：抗氧化作用 绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂，其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茴香醚（BHA）和生育酚。绿原酸之所以有抗氧化作用，是因为它含有一定量的R-OH基，能形成具有抗氧化作用的氢自由基，以消除羟基自由基和超氧阴离子等自由基的活性，从而保护组织免受氧化作用的损害。 功用：清除自