原核生物基因表达号与调控.ppt

基因表达的组织特异性:不同组织细胞中不仅表达的基因数量不相同，而且基因表达的强度和种类也各不相同。 基因表达的阶段特异性:一般在胚胎时期基因开放的数量最多，随着分化发展，细胞中某些基因关闭、某些基因转向开放，胚胎发育不同阶段、不同部位的细胞中开放的基因及其开放的程度不一样，合成蛋白质的种类和数量都不相同。 即使是同一个细胞，处在不同的细胞周期状态，其基因的表达和蛋白质合成的情况也不尽相同。 顺式作用元件（cis-acting element）: 不转变为其他形式（RNA或蛋白质）而只以DNA形式在原来位置起作用的DNA序列。起作用的过程称顺式作用。 反式作用因子（trans-acting factor）: 能从合成地点扩散到其它场所对其他基因的表达起调控作用的蛋白质因子（有时为RNA）。起作用的过程称反式作用。 阻遏物（repressor）: 阻止基因表达的蛋白质，可与操作子结合来阻止转录，为负调控蛋白。 激活物（activator）:促进基因转录的蛋白质 ，为正调控蛋白。 二者都是调节基因的产物。 正调控（positive control）: 激活物通过与启动子元件结合来激活基因的表达。 即：没有调节蛋白（激活物）存在时，结构基因是关闭的，而加入调节蛋白后,结构基因的表达活性被开启。 乳糖操纵子的结构组成 乳糖操纵子的阻遏状态 乳糖操纵子的诱导状态 2） CAP- cAMP的正调控 1.结构 2.阻遏调控机制 ①Trp Operon mRNA的前导序列结构 : ②前导序列的二级结构: 决定RNApol在弱化子处是终止转录还是继续转录 ★ 序列2和3配对时，RNApol继 续转录，使前导序列后的结构 基因得以转录。 一、ara操纵子模型 1、ara操纵子的结构基因 在葡萄糖缺乏时，阿拉伯糖是另一个可以为大肠杆菌提供碳源的五碳糖，在大肠杆菌中阿拉伯糖的降解需要3个基因： araB基因：编码核酮糖激酶 araA基因：编码L-阿拉伯糖异构酶 araD基因：编码L-核酮糖-5-磷酸-4-差向异构酶。 它们是一个基因簇，简写为araBAD。由这3种基因编码的3种酶能够把阿拉伯糖分解为大肠杆菌能够利用的五碳糖。 ara操纵子模型 : 二、AraC蛋白的正、负调节作用 1、AraC蛋白的正调节作用 在有阿拉伯糖存在时，AraC蛋白二聚体与阿拉伯糖形成AraC蛋白·阿拉伯糖复合物，复合物与araI激活区（ I1和I2 ）结合，激活PBAD，活化RNA聚合酶，使结构基因mRNA正常转录，产生上述3种酶，完成调控。 AraC蛋白的正调节作用 2、AraC蛋白的负调节作用 没有阿拉伯糖时，AraC蛋白的两个单体同时与ara I1及远距离的araO2区结合，造成DNA链的扭曲，不能起始mRNA的转录。 1和2、3和4配对 ★ 序列1和2、3和4配对时，RNApol在3、4区的不依赖ρ因 子的终止子处终止,其后的trpE等基因表达受到限制。 2和3配对 ③弱化子弱化控制的机制 Prok.无核膜，转录和翻译偶联 a.细胞缺少trp时，Trp-tRNATrp水 平低，核糖体停顿在两个邻 近的Trp密码子处，此时核 糖体占据序列1，此时序列4 还没转录出来，序列2和3有 机会配对，RNApol可通过弱化子。 b. 当细胞有Trp时,Trp-tRNATrp水平很高,核糖体顺利地翻译出前导肽而在终止密码子处(+70,UGA位于序列1和2之间)解离。 此时,核糖体占据了序列1和部分序列2,使序列2不能有效地和序列3配对,因而序列3和4产生终止子发夹结构,转录终止 。 ? 实现弱化子对转录的调控关键是时间和空间上的巧妙安排 空间上：两个Trp的codon位置至关重要 时间上：核糖体停顿在两个Trp codon上时，序列4还没 转录出来，否则…… 这种巧妙安排的一个原因就是RNApol在转录完+90序列处时产生一次延宕给与核糖体以追赶的机会。 ④Prok.中弱化子（衰减子）的普遍性 许多负责氨基酸合成的操纵子都受弱化子的控制，尤其是 His 操纵子中，弱化子是唯一的调控机制。 第四节 正调控 2、ara操纵子的结构 与araB、araA和araD这3结构基因相邻的是一个复合启动子区和一个调节基因araC，由调节基因araC合成的AraC蛋白是一个自我调节蛋白（autoregulated prot