第五章大环内酯类抗生素.pptVIP

三、 红霉素的生产工艺 红霉素是1952年由麦夸尔等于菲律宾群岛找到的红霉素链霉菌所产生的代谢产物。 目前仍然采用该菌的变株来生产红霉素游离碱，再由其制成各种盐类或酯类，如乳糖酸红霉素、红霉素硬脂酸酯、红霉素碳酸乙酯和无味红霉素等。 一、 生产菌种 一、 生产菌种 菌种特征： 红霉素链霉菌在合成琼脂培养基上生长的菌落，是由淡黄色变为微带褐的红色 菌种选育：快中子效果最好。 侧重抗噬菌体菌株的选育。 二、 发酵工艺及控制要点 砂土孢子——→母斜面————→子斜面————→种子罐———————→繁殖罐——————→发酵罐——————→发酵液——→提炼 红霉素发酵一般采用孢子悬液接入种子罐，经二级种子扩大培养后移入发酵罐、利用分批补料的方式，进行发酵生产。 1．孢子制备及控制要点 孢子培养一般采用淀粉、玉米浆、硫酸铵等琼脂斜面培养基，37℃，培养7-8d，长成熟。应该避光培养。 孢子培养基中的配比适当与斜面孢子的质量和菌种的发酵单位有重要的关系。琼脂本身的质量对孢子质量和数量也有重要的影响，而这一点常常为人们所忽视。 2．种子培养及控制要点 种子培养是采用淀粉、葡萄糖、黄豆饼粉、硫酸铵和碳酸钙等组成的培养基。 各级种子于28-35℃进行培养，经一定时间后，种子生长成熟，即可加入发酵罐。 种子培养基的成分和质量对孢子发芽和种子质量有重要关系，种子质量还与种子培养时消耗功率的大小有明显关系。 3．发酵生产及控制要点 红霉素发酵一般都使用复合培养基：淀粉、葡萄糖为碳源；黄豆饼粉、硫酸铵为氮源以碳酸钙作缓冲剂；丙酸作为前体。接种量为10％。培养温度为28—35℃，pH值为7。 (1)培养基 碳源：发酵培养基最适碳源是蔗糖，各种碳源的效果大小的顺序为，蔗糖＞葡萄糖＞淀粉＞糊精。采用葡萄糖和淀粉的混合碳源，其效果与使用蔗糖是相似的。 氮源：黄豆饼粉、玉米浆比较好。 前体：丙酸，流加正丙醇，如表5-5. 无机盐：铁盐有抑制作用。以P、Mg为最主要，对促进前体的生长和生物合成有显著影响。 (2)发酵条件控制 通气量的影响。在稀薄培养基中，通气效率较好，能够满足菌的需氧量，所以红霉素的生物合成不受通气的影响。但在丰富培养基中，红霉素的产量则随通气速率的增加而提高。 pH值的影响：红霉素链霉菌生长的最适pH值为6．6—7．0，而红霉素合成的最适PH值为6．7—6．9。 当PH6.3时，红霉素部分失效，再低下时，生物合成停止 当PH高于7.2时，菌丝很快自溶，同时导致C组分上升，对产品质量影响很大。 二氧化碳的影响：有明显的抑制红霉素生产的作用。 三、 提取和精制 1、萃取剂的选择 （1）有机溶剂的选择：醋酸丁酯、二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷。 （2）缓冲溶液：醋酸、草酸、硼酸、柠檬酸。 2、pH的选择：pH9-10用醋酸丁酯萃取，然后再pH4-5用磷酸缓冲液反萃取，萃取选择性最高，红霉素最纯。 3、成盐：红霉素乳酸盐。 第三节 利福霉素类抗生素 利福霉素是1975年由意大利Lepetit研究室Sensi等发现的，他们从地中海拟无枝酸菌的培养液中可以得到利福霉素A、B、C、D、E五种组分 。利福霉素成员虽多，但抗菌活性不一，有实用价值者甚少 。 一、结构 利福霉素各结构组分上的差异在于芳香核上侧链的不同。 二、抗菌特性 这类抗生素的毒性低、疗效高且抗菌谱较广，可特异性地与依赖DNA的RNA聚合酶作用，抑制细菌DNA的转录过程；而且对肿瘤RNA病毒的依赖RNA的DNA逆转录酶有抑制作用。广泛应用于治疗G＋(革兰氏阳性菌)、结核病、麻风病和与艾滋病有关的分枝杆菌感染。 三、利福霉素SV的生产工艺 （一）生产菌种 利福霉素产生菌是1975年米兰研究室从法国拉斐尔植物园土样中分离筛选获得，当时将其分类为地中海链霉菌，属于放线菌。后来根据生物化学分类法划入诺卡式菌属（因其细胞壁化学组成有消旋二氨基康二酸、阿拉伯糖、半乳糖） 。 （二）发酵过程及工艺要点 1、培养基 碳源：甘油和葡萄糖。 氮源：黄豆饼粉，蛋白胨。 无机盐：硝酸盐较好。 前体：丙酸盐。0.07%。 2、培养条件 培养温度为28℃，pH7.0-7.3。 发酵培养： （1）补料 （2）溶解氧 （三）提取和精制 1、大环内酯类抗生素的结构特点、作用机理。 2、红霉素的物化特性及其生产过程 结束 * * 第五章 大环内酯类抗生素 　　Macrolides antibiotics 第一节 概述 一、含义：大环内酯类抗生素(Macrolides antibiotics) 是以一个大环内酯为母体．通过羟基，以苷键和1—3个分子的糖相联结的一类抗生物质。 大环内酯，或称巨环内酯，这个大环亦是连结一个或多个脱氧糖（多是红霉糖及脱氧糖胺）的内酯环，内酯环可以是由12、14、15或