代谢综合征心肌纤维化发病机制及药物干预的研究-内科学(心血管病)专业论文.pdf.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方 式标明。本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：盂空戤垃 日期： 盈：皇!垒 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：丑煎避导师签名：荔益兹，目 期：地鼋：生!＆ 山东大学博士学位论文论文I 山东大学博士学位论文 论文I 白介素-1 8在代谢综合征心肌纤维化发病机制中的作用 博士研究生 邢姗姗 博士生导师 张薇 专 业 内科学(心血管病) 中文摘要 背景 过去的二十年里，全球代谢综合征(MS)的患病率逐年递增，糖尿病及肥 胖人数也随之增加。随着MS带来的心血管病发病率的上升，我们认识到防治这 一全球性疾病迫在眉睫。MS是包括糖耐量异常、胰岛素抵抗、腹型肥胖、血脂 异常及高血压等心血管疾病危险因素的一组症候群。胰岛素抵抗被认为是该综合 征的核心的病理生理学基础。而炎症可能在MS中起重要作用。 临床研究证实MS患者有不同程度的左室舒张功能障碍，表现为心肌松弛性 减低和僵硬度增大。心肌纤维化是左室舒张功能障碍发生发展的重要机制，但在 MS中的发生机制尚不明确。研究表明炎症是除肾素．血管紧张素．醛固酮(RASS) 系统和高血压之外致心肌纤维化的重要因素，许多炎症因子参与了心肌纤维化的 形成和发展。而MS是一种慢性炎症状态，血中炎症因子高敏C反应蛋白 (hs．CRP)、白介素．6(IL-6)、白介素．18(IL-18)等都有升高。IL-18作为ILl 家族成员之一，可以通过激活姗信号转导通路参与一些反应。YNK信号转导 通路是将信息从细胞表面传到细胞核内的一系列丝氨酸／苏氨酸酶，主要对细胞 的生长发育起介导作用。位于JNK信号转导通路下游的核因子AP．1包含 c-jun／c-fos蛋白，姗(通过激活AP-l使存在AP．1结合位点的基因表达增强。 与心肌纤维化有关的基因，例如I型胶原、III型胶原、基质金属蛋白酶．2 山东大学博士学位论文(MMP．2)、MMP．9基因，都存在AP．1的结合位点。因此我们推断IL-18可以 山东大学博士学位论文 (MMP．2)、MMP．9基因，都存在AP．1的结合位点。因此我们推断IL-18可以 通过激活JNK／AP．1信号转导通路加重心肌纤维化参与MS的发生发展，这在国 内外均未见研究报道。 本研究在综合分析心肌纤维化研究动态和细胞信号转导途径的基础上，提出 “IL-18／JNK／AP．1一信号转导通路在MS心肌纤维化发病中可能起重要作用的 假说，利用转染IL-18腺病毒载体技术，深入研究IL-18在MS心肌纤维化发生 发展中的作用。 目的 (1)建立果糖喂养Wistar大鼠MS的动物模型； (2)观察MS大鼠模型心肌组织病理学和超微结构的变化，明确心肌纤维化存 在及分布特点； (3)明确“ILq8／JNK／AP．1信号转导通路各关键分子在MS大鼠心肌组 织的表达： (4)构建IL-18腺病毒载体并转染MS大鼠，验证“IL-18／YNK／AP．1信号 转导途径在MS心肌纤维化发生发展的作用； (5)采用超声心动图技术和心导管技术全面评价MS大鼠模型以及转染IL．18 腺病毒载体后MS大鼠心脏结构和功能的变化。 方法 雄性Wistar大鼠50只，随机分为两组：正常对照组(n=12只)，MS组(n=38 只)。正常对照组以标准大鼠饲料喂养，并给予普通饮水；MS组大鼠以标准大 鼠饲料喂养，并给予10％高果糖饮水。高果糖喂养32周后，将MS组大鼠随机 分为三组：MS组(，网只)，继续给予高果糖饮水；空载体组(，网只)，继续 给予高果糖饮水的同时通过尾静脉注射1×1010pro含GFP腺病毒载体；IL-18载 体组(n=13只)，继续给予高果糖饮水的同时通过尾静脉注射lxl010pFU IL-18 腺病毒载体：正常对照组及MS组给予等体积的生理盐水尾静脉注射。转染腺病 毒载体6周后，处死动物，取大鼠心肌组织进行实验。实验过程中，进行以下检 测：(1)各组大鼠每两周测量体重及尾动脉血压一次；(2)分别于实验前，高果糖 喂养32周后，转染载体后1周、2周、3周、4周、6周抽取各组大鼠颈静脉窦 血2ml检测