抑制肝内胆管癌细胞增殖的表观遗传学药物筛选及hc toxin对cclp-1细胞的作三官用机制研究.docxVIP

硕士学位论文CCLP．1增殖及克隆形成能力的影响。 硕士学位论文 CCLP．1增殖及克隆形成能力的影响。 2．用光学显微镜下观察吉姆萨染色前后HC Toxin对ICC细胞CCLP-1的形态 学影响，探索该过程中可能的生物学过程。 3．用7．AAD染色的流式细胞技术，检、狈wJICC细胞CCLP．1经HC toxin处理一定 时间后的细胞周期的分布，探索HC toxin对ICC细胞周期的影响。 4．用Annexin V FITC和7-AAD联合染色的流式细胞技术，检钡IJICC细胞 CCLP．1经HC toxin处理一定时间后细胞的凋亡情况，探索HC toxin对细胞凋亡的 影响。 5．在上述实验产生阳性结果的前提下，用蛋白免疫印迹法(Western Blot) 检测ICC细胞CCLP．1经HC toxin处理一定时间后，凋亡相关蛋I圭tcaspase 3、bax、 bcl．2、cytochrome c等的表达水平变化，探索HC toxin可能的细胞凋亡途径。 实验三： 1．用反转录实时荧光定量PCR(RT．qPCR)检钡tJICC细胞CCLP-1经HC toxin 处理一定时间后Notchl等部分重要基因转录情况变化。 2．用细胞免疫荧光试验(Immunofluorescence，IF)及蛋白免疫印迹法 (Western Blot)，检钡[JICC细胞CCLP．1经HC toxin