自来水中菌落总数的测定.doc

课题：自来水中菌落总数的测定 使用教材：《食品微生物检验》 教材分析： 本节课是《食品微生物检验》中的重点内容，是GB4789·2中规定的测定食品中菌落总数的常规方法，也是质检专业学生必须掌握的重要技能之一。其程序包括取样—稀释—接种—培养，其中前三项都要求无菌操作。对于即将就业的学生，教学重点应放在测定方法及程序的掌握上，这样能使他们在将来的质检工作中对常见指标的检测做到得心应手。因此，本次实验课老师要先演示清楚，大部分时间放在指导学生自己操作上。无菌操作是微生物检验实验的基本原则，同时也是一大难点，因为它要求操作者要手指灵活、双手配合得当、动作迅速、心细。对于只做过理化实验并且仪器操作尚且不规范的学生来说，在本实验中要让他们认识到无菌操作的重要性并掌握无菌操作的基本动作。为此，我打算采用让学生无菌操作，然后老师非无菌操作的方法，以实验结果的对比让学生建立无菌操作意识。 一、教学目标： 1、了解菌落总数测定原理 2、掌握菌落总数的测定方法，建立无菌操作意识 二、教学重点：菌数总数测定方法 三、教学难点：无菌操作 四、教学方法：老师演示，学生分组实验，评比记分 五、课时安排：2课时 六、教学过程： （一）引言（2分钟） 现在天热了，有些学生喜欢喝自来水解渴，自来水看起来清亮亮的，里面有细菌吗？有多少？能不能直接喝？今天我们就来学习水中菌落总数的测定方法，用这种方法测测我们学校自来水中的细菌含量，这项技能是质检工作者必须掌握的，大学一定要认真学习，争取当节掌握。 （二）介绍实验目的、原理（5分钟）（板书） （三）介绍实验器材（实物）（3分钟） 无菌三角瓶、无菌移液管、无菌平皿、（装有9ml无菌水的）无菌试管、试管架、酒精灯、火柴、洗耳球、无菌牛肉膏蛋白胨培养基（放置50℃左右水浴锅中备用）、恒温培养箱（37℃ ） （四）演示实验步骤并讲解（20分钟） 1、取样：先将自来水龙头用火焰灼烧3分钟灭菌，再开放水龙头，让水流5分钟后，以无菌三角瓶接取25ml左右。（提问：为什么不直接接取？） 2、稀释：用无菌移液管从水样中取1ml，以无菌操作方式移入盛有9ml无菌水的试管中，做成10倍稀释液；换用一支无菌移液管，从10倍稀释液中取1ml，放入另一支含有9ml无菌水的试管中，做成100倍稀释液，依次递增稀释至1000倍。（提问：为什么每次要换用一支移液管？你还能想到其它的稀释方法吗？） 3、倾注接种：取无菌平皿一套，以无菌移液管取1ml稀释液注入其中，再倾入约15ml50℃的普通琼脂培养基，轻轻做平面旋摇。如此，每稀释度做三个平板。（提问：培养基为什么要保持50℃左右？） 4、培养：琼脂凝固后，将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养24小时。（提问：平板为何要倒置？） （五）学生分组实验，严格无菌操作，老师巡回指导、记分。（50分钟） 1、取样（操作要点：水龙头、器皿灭菌） 2、稀释（操作要点：移液管的正确使用及无菌操作） 3、接种（操作要点：培养基的温度和量） 4、培养（操作要点：平板倒置） （六）老师非无菌操作做几个平板，以做对比。 （七）看上组实验结果，对比无菌操作和非无菌操作的结果，讲解结果处理和报告方法。（10分钟）（板书） （八）总结（10分钟）： 1、提问：①在操作中，为什么要严格遵循无菌操作？ ②你认为菌落总数是否是1ml样品的总菌数，为什么？ 2、结语：此次实验，我们应学会菌落总数的测定方法，认识到无菌操作在微检实验中的重要性。从实验结果来看，我校自来水符合国家标准，但每毫升所含细菌量还是相当多的，按每口喝10ml水计算，可以喝到近900个细菌，所以，以后大家要少喝或不喝生水，养成良好的生活习惯。 （九）布置作业：写实验报告 教学后记：菌数总数的测定是食品检验工技能鉴定实作考试的常见题，在当前职业学校普遍推行“双证制”毕业的大形势下，掌握这项技能显得尤为重要。为此我在本次实验课教学中以技能鉴定的要求为标准逐步操作，严格打分，使大部分学生达到了熟练掌握。但实验中有一部分学生基本操作不规范，以后实验中应进一步加强基本操作训练。在教学中采用对比法，使学生直观地认识到无菌操作的重要性，以后应多采用对比实验法。 七、板书设计： 一、实验目的：学习自来水的取样方法，掌握测定菌落总数的方法。 二、实验原理：菌落总数是指1ml在普通琼脂培养基上，37℃培养24小时后生长的菌落数，菌落数越多，说明其污染程度越严重，一般规定，1ml水的总菌数不得超过100个。 三、实验步骤：取样——梯度稀释——倾注接种——培养——菌落计数——结果报告 四、结果处理和报告方法（见课本表格）