核酸的结坠构与功能.ppt

第2章核酸的结构与功能 Structure and Function of Nucleic Acid 高国全 2010-09-19 1868年 Fridrich Miescher 从脓细胞中提取核素。 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质。 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构。 1968年 Nirenberg发现遗传密码。 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶。 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA测序方法。 1985年 Mullis发明PCR技术。 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP)。 1994年 中国人类基因组计划启动。 2001年 美英等国完成人类基因组计划。 碱基的互变异构体 定义 核酸中核苷酸的共价连接和排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 亲水性的骨架位于双链的外侧。 疏水性的碱基位于双链的内侧。 核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 核酸的高分子性质 粘度：DNARNA dsDNA ssDNA 沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。 第五节 核酸酶 Nuclease 转运RNA (transfer RNA, tRNA)在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体, 将氨基酸转呈给mRNA。 由74～95核苷酸组成； 占细胞总RNA的15%； 具有很好的稳定性。 二、tRNA是蛋白质合成中的氨基酸载体 （一）tRNA中含有多种稀有碱基 tRNA具有局部的茎环(stem-loop)结构或发卡(hairpin)结构。 （二）tRNA具有茎环结构 tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 TψC环 附加叉 tRNA的倒L三级结构 tRNA的3?-末端都是以CCA结尾。 3?-末端的A与氨基酸共价连结，tRNA成为了氨基酸的载体。 不同的tRNA可以结合不同的氨基酸。 （三）tRNA的3?-末端连接氨基酸 tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子(anticodon)。 tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。 （四）tRNA的反密码子识别mRNA的密码子 核蛋白体RNA (ribosomal RNA，rRNA)是细胞内含量最多的RNA(80％)。 rRNA与核蛋白体蛋白结合组成核蛋白体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。 三、以rRNA为组分的核蛋白体是蛋白质合成的场所 核蛋白体的组成 占总重量的35% 49种 占总重量的30% 31种 蛋白质 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.85S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 23S 5S rRNA 60S 50S 大亚基 占总重量的50% 33种 占总重量的40% 21种 蛋白质 1874个核苷酸 18S 1542个核苷酸 16S rRNA 40S 30S 小亚基 真核生物（以小鼠肝为例） 原核生物（以大肠杆菌为例） 大肠杆菌的核蛋白体 18S rRNA的二级结构 蛋白质合成时形成的复合体 RNA组学(RNomics)研究细胞内snmRNA的种类、结构和功能, 不同时空状态下snmRNAs表达谱的变化，以及与功能之间的关系。 四、snmRNA参与了基因表达的调控 细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。 snmRNAs 核内小RNA snRNAs/snRNPs 核仁小RNA snoRNAs/snoRNPs 胞质小RNA scRNAs 催化性小RNA ribozyme/catalytic 小片段干涉 RNA siRNAs/RNAi 微小RNA miRNAs snmRNAs的种类 核酶 某些小RNA分子具有催化特定RNA降解的活性，这种具有催化作用的小RNA亦被称为核酶(ribozyme)或催化性RNA(catalytic RNA)。 siRNA是生物宿主对外源侵入的基因表达的双链RNA进行切割所产生的特定长度和特定核酸序列的小片段RNA。 siRNA可以与外源基因表达的mRNA相结合，并诱发这些mRNA的降解。 基于此机理，人们发明了RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术。 小片段干扰RNA noncoding RNA, single strand about 22 bases complementary to particular mRNAs cleaving mRNA or suppressin