电动势法研究蛋白质与季铵盐Gemini表面活性剂的相互作用-应用化学.PDFVIP

第２８卷 第７期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．２８Ｉｓｓ．７ ２０１１年７月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｊｕｌｙ２０１１ 电动势法研究蛋白质与季铵盐Ｇｅｍｉｎｉ表面 活性剂的相互作用  宁爱民 　党玉丽　赵士举　宛新生　郑先福 （河南农业大学理学院　郑州４５０００２） 摘　要　利用自制的季铵盐Ｇｅｍｉｎｉ表面活性剂二溴化Ｎ，Ｎ′二（二甲基十二烷基）丙二铵（Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ）离 １２ １２ 子选择电极，通过电动势（ＥＭＦ）法研究了Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）之间的相互作用，得到了 １２ １２ Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ在ＢＳＡ大分子上结合过程的结合等温线和对应的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ曲线，并通过结合能力的概念得到 １２ １２ 了结合过程的结合位点数、Ｈｉｌｌ系数及Ｈｉｌｌ结合常数。通过研究发现，Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ与ＢＳＡ大分子的结合具 １２ １２ 有正的协同作用，相互结合的位点可以分为两类，第一类为主要通过静电作用结合的强结合位点，第二类为主 要通过疏水作用结合的弱结合位点。 关键词　季铵盐Ｇｅｍｉｎｉ表面活性剂，电动势，牛血清白蛋白，结合等温线，结合能力 中图分类号：Ｏ６４７．２　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１１）０７０８２６０５ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１１．００５３４ ［１１１］ ［１］ ［２］ 表面活性剂与蛋白质的相互作用的研究方法日益完善 。徐桂英课题组 和刘洪来课题组 等 对季铵盐Ｇｅｍｉｎｉ表面活性剂与牛血清白蛋白的相互作用，分别通过表面张力、荧光光谱、圆二色光谱和 光散射等方法进行了研究。在诸多研究蛋白质大分子与表面活性剂相互作用的方法中，最简单有效的 ［３］ 方法是直接测得表面活性剂在大分子链上的结合量。平衡渗析法 是测定表面活性剂与大分子结合等 温线最早的研究方法之一。该方法的原理是，渗析池中渗析膜的一侧是表面活性剂与大分子的混合溶 液，膜的另一侧是单一的表面活性剂溶液。当达到渗析平衡时，分别测定膜两侧表面活性剂的浓度，由 此计算表面活性剂在大分子上的结合量。但该方法耗时较长并且实验过程中需做繁琐的化学分析，并 且数据的重现性较差［３］。通过牛血清白蛋白分子上色氨酸残基的内源荧光强度的变化可以间接得到结 ［２，４］ 合量 ，但本方法存在的误差相对较大。而利用表面活性剂选择性膜电极则可以克服以上缺点。 应用表面活性剂选择性膜电极研究表面活性剂与大分子相互作用的报道还较少。主要有 Ｗａｎｇ ［６］ ［７１０］ 等 和Ｂｏｒｄｂａｒ课题组 利用该方法研究普通表面活性剂与蛋白质等大分子之间的相互作用。徐桂 ［１２］ 英课题组 利用该方法研究了阴离子聚电解质和黄原胶等与表面活性剂之间的相互作用。目前还未 见有关利用Ｇｅｍｉｎｉ表面活性剂选择性膜电极研究其与蛋白质大分子相互作用的报道。 本文制备了季铵盐Ｇｅｍｉｎｉ阳离子表面活性剂二溴化Ｎ，Ｎ′二（二甲基十二烷基）丙二铵（简写为 Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ）选择性膜电极，然后利用电动势法研究了Ｃ３Ｃ ·２Ｂｒ与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）之间的相 １２ １２ １２