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· · 第三十章 层析法测定生物化学物质
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第二节 糖化血红蛋白测定
糖化血红蛋白( )是红细胞中 与葡萄糖持续且不可逆地进行非酶促蛋白糖基化反应
GHb Hb
。 、 、 ,
的产物 GHb作为糖尿病诊断 血糖控制 疗效评价的有效监测指标 在临床中得到了广泛
使用。
、
一 测定方法概述
, :
临床实验室 的测定方法有多种 但按其理化性质可分为二大类 根据糖化与非糖化
GHb ①
, , ;
所带电荷的差异 分离 和 如离子交换层析和电泳法 根据糖化与非糖化
Hb HbA HbA ② Hb
0 1c
, 。
的结构差异和 Hb上糖化基团的结构特点 采用亲和层析和免疫化学法测定 目前国内外临床
、 。
实验室常用测定方法是离子交换 HPLC亲和层析及免疫化学三大主流方法 免疫化学法是利
用抗原与抗体反应的原理设计。 的 链 末端提供了一个容易被抗体识别的抗原表位,
HbA1c β N
。
可以采用单克隆抗体特异性识别其 链 末端最后 个氨基酸组成的抗原表位 以
β N 3~4 HbA1c
, , , ,
为标准 结合比色或比浊法 测定 HbA1c含量 再测定 Hb的含量 最后计算出 HbA1c占总 Hb的
。 。 , :
百分比 免疫化学法可溯源到离子交换 HPLC法 但高浓度样本测定结果偏低 可能的原因
, ,
一是由于此法的特异性比目前的一些方法高 二是由于试剂盒抗体浓度不能达到相关高度 需要
。 , 。
稀释样本 理论上此法不受变异血红蛋白影响 但研究发现变异血红蛋白可影响测定结果 该
, , 。
法精密度不及 HPLC法 所以 临床最常用的是离子交换层析法和亲和层析法
、
二 离子交换层析法
, ,
糖化导致GHb分子表面阳离子丢失 因而基于 HbA1c与其他 Hb带电荷不同 采用阳离子交
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