透析管体外消化法测定饲料蛋白质消失率的适宜酶促-动物营养学报.PDF

11 卷 4 期 动物营养学报 Vol . 11 ,No . 4 ,5 1～58 1999 年 10 月 A C TA ZOON U TR IM EN TA SIN ICA Oct . 1999 文章编号 : 1006 - 267X ( 1999) 04 - 005 1 - 08 透析管体外消化法测定饲料蛋白质 消失率的适宜酶促反应条件研究* 黄瑞林 ,李铁军 ,谭支良,邢廷铣 ( 中国科学院长沙农业现代化研究所 ,长沙 4 10 125) 摘要 : 本研究在实验室条件下建立了一个测定饲料蛋白质消失率的体外透析管分 析方法 , 并分析了温度 、酶液浓度和酸度等因子对酶促反应的影响 。结果表明 , 用体 外透析管法测定蛋白质消失率的适宜条件是 : 在温度为 35 ℃时 , 准确称取 1g 样品 ( ) ( ) 精确至 0. 000 1 于三角瓶中 ,加 H2 . 0 的胃蛋白酶溶液 浓度为 0. 00 1 / ml ,水解 g p g ( 4 小时 , 经中和后转移至透析管中 , 再加 H 7. 6 的胰蛋白酶溶液 浓度为 0. 0025 p g/ ml) ,透析管再置于盛 300ml 透析液的大三角瓶中 ,水解 24 小时 ,然后对透析管外 的透析液定量分析蛋白质含量 , 最后计算出样品的蛋白质消失率 。并与体内消化试 ( ) 验结果进行了回归分析 : Y = 1. 0 129X + 32 . 97 ,达到强相关程度 r = 0. 999 。 关键词 : 蛋白质消失率 ; 体外法 ; 透析管 中图分类号 : S 8 16 . 17 文献标识码 : A 饲料的蛋白质和氨基酸消化率是评价单胃动物饲料营养价值最为重要的指标之一 , 它为 合理地制定动物饲料配方提供依据 。长期以来 , 无论是传统的粪分析法还是现代的回肠末端 ( ) ( ) 消化率测定方法 ,都是经典的动物体内 in vivo 平衡试验方法 Yin Yulo ng 等 , 1993 ,其测定 ( ) 结果直观 、可靠 ,但十分繁琐 ,也耗资旷时 。为此 ,寻求一种体外 in vit ro 试验方法来测定蛋白 质和氨基酸消化率 , 以此评价饲料的营养价值就显得十分必要 。因此 ,本研究的目的是按仿生 学原理 ,用具有半透膜性质的透析管模拟动物肠道消化吸收的生理环境 , 以活力稳定的生化试 ( ) 剂 酶 代替猪小肠液 ,研究体外测定饲料蛋白质消化率的适宜酶促反应条件 ,为最终建立一个 ( ) 适用于评价单胃动物 猪 饲料营养价值的体外透析管法提供依据 。 1 材料与方法 1. 1 标准样品 市购秘鲁鱼粉