同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌探究蒋建东.pdfVIP

下载本文档

9
0
约2.78万字
约 8页
2019-01-17 发布于安徽
举报
版权申诉

同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌探究蒋建东.pdf

1、本文档共8页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

21 6 Vol. 21 No. 6 2005 11 Chinese Journal of Biotechnology November 2005 Construction of Multifunctional Genetically Engineered Pesticides-degrading Bacteria by Homologous Recombination * 蒋建东, 顾立锋, 孙纪全, 代先祝, 文阳, 李顺鹏 * JIANG Jian-Dong, GU L-i Feng, SUN J-i Quan, DAI Xian-Z u, WEN Yang and LI S un-Peng , , 210095 College of Lfi e Sciences, Key Laboratoryf or Microbiological Engineering of Agricultural Environment fo Ministry of Agriculture, Nanj ing Agricultural University, Nanj ing 210095, China 构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良的菌种资源, 然而, 构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点通过以受体菌的16S rDNA 为同源重组指导序列sacB 基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体, 二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因( mp ) 整合到呋喃丹降解菌Sphingomonas sp. CDS- 1 染色体的 16S rDNA 位点, 分别成功构建了含 1 个和2 个mp 基因插入到rDNA 位点且不带入外源抗性的基因工程菌株CDS-mpd 和CDS- 2mpd同源重组单交换的效率为317@ 10- 7~ 618@ 10- 7 通过 PCR 和Sout ern 杂交的方法验证了同源重组事件基因工程菌遗传稳定, 能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹甲基对硫磷水解酶( MPH) 的比活在各生长时期均高于原始出发菌株, 比活最高达6122 muPLg 同源重组, rDNA, sacB , 基因工程菌, 农药降解, 生物修复 Q933 A 1000-3061( 2005) 06-0884-08 Abstract Construction of multifunctional pesticides-degrading genetically engineered microorganisms ( GEMs) is increasing important in t e bioremediation of various pesticides contaminants in environment. However, construction of genetically stable GEMs wit out any exogenous antibiotic resistance is t oug t to be one of t e bottlenecks in GEMs construction. In t is article, omologous recombination vectors wit t e recipientcs