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重叠损失补偿 理想情况是细胞一个个的通过小孔,但是孔的直径100um,所以在实际操作过程中,会存在两个、三个甚至更多细胞,一同或前后尾随进入小孔的可能性,这种情况虽然产生脉冲,脉冲幅度比单个细胞要高,但它只能产生一个信号脉冲,使计数有所丢失,这种现象称为重叠损失。 (三)血细胞检测系统 细胞A 细胞B 检测脉冲 检测脉冲 重叠校正规律:计算值在8000以下时不校正,计数值在8000~38000时,每计数1000个,补充100个,即在这个范围内,计数电路每计900个便向千位进1,在38000以上时,每计数1000个补充200个,即在38000以上,计数器每计数800个向千位进1。 2.流式光散射检测系统 流式光散射检测技术:由激光光源、检测装置和检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成 激光光源 散射光检测器 光电倍增管 荧光检测器 鞘流形式的装置 检测装置 (三)血细胞检测系统 (四)血红蛋白测定系统 由光源、透镜、流动比色池、滤光片和光电传感器等组成。 光源灯 透镜 狭缝 流动比色皿 半透反射镜 滤光片540nm 光电池 样品信号A 滤光片 690nm 光电池 参考信号B (五)计算机控制系统 ①计算机中的微处理器(MPU) -中央处理单元(CPU):算术逻辑部件、寄存器、控制部件、内部总线、存储器、输入/输出电路。输入/输出电路是CPU和外部设备之间交换信息的接口。 ②外部设备:显示器、键盘、磁盘、打印机等。键盘通过控制电路与内置电脑相连。控制操作功能键有: 电源开关POWER 样品号键 SAMPLE 选择键 SELECT 自动/手动选择键AUTO/MANUAL 重复键REPEAT 计数键COUNT 打印键PRNT 进给键FEED 输入键 ENTER 清除键CLEAR 清洗键 CLEAN 四、血细胞分析仪的性能指标与评价 1.测试参数:16-46个不等 2.细胞形态学分析:直方图、WBC分类、幼稚细胞提示、RET计数分析。无论多么先进的血细胞分析仪,进行细胞分类都只是一种过筛手段,并不能完全取代人工镜检分类。 (一)仪器的性能指标 P70 结果异常、图异常、仪器报警时要考虑人工复检。 3.测试速度:40-150个/小时 4.样本量:20-250ul 采血量够、无凝块、无棉纤维、无溶血等;EDTA-K2抗凝, 储存室温2h内;最好用真空采血管。 5.工作条件与基本功能 见表5-1 P71 环境温度18-25℃。 提供中文报告、异常报警、有与实验室信息系统(LIS) 链接功能。 6.技术要求。见表5-2、3、4 P71 (一)仪器的性能指标 (二)血细胞分析仪的评价 1.精密度: 指重复测定中各次试验结果彼此接近的程度。 用高、中、低值新鲜全血各10份进行评价。 用标准差(SD)或变异数(CV)表示。 2.携带污染率: 指含量高的样本对含量低的样本所产生的影响。 取高低2个样品标本,先测定高值样品3次(H1,H2,H3), 随时测定低值样品3次(L1,L2,L3)。 携带污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。 P72 3.总重复性: 包括了重复测定的随机误差和携带污染双重变异因素。 随机取标本20份,常规分别测定即刻的RBC,WBC,Hb及 放置2h,4h后的数值。分别测定RBC、WBC、Hb的重复试 验变异数(CV)。 P72 (二)血细胞分析仪的评价 4.线性范围: 是测试物浓度的变化与试验结果成线性关系的一段。 越宽越好。至少应包括正常范围及常见的病理范围。 5.白细胞分类的评价: ①重复性:多次测定同一份血液能否得到非常近似的结果。 ②准确性:与显微镜下分类结果的相关程度。 ③对异常细胞的灵敏度:观察外周血存在异常细胞,仪器是否能检出。 P72 (二)血细胞分析仪的评价 (三)血细胞分析仪的校准 出厂前已经过厂方技术鉴定合格,但由于运输振动或因故障维修后或长时间停用后再启用等原因,以及正常使用半年以上或认为有必要时,都必须对仪器进行校准及性能测试,这对了解仪器性能,发现问题,确保检验质量有重要意义。 一般要求专人保养,按说明书要求用厂家的配套校准物 进行校准。 五、血细胞分析仪的维护与常见故障排除 (一)仪器的维护 血细胞分析仪属高精密仪器,应有专人负责,按仪器厂家的的要求进行日保养、周保养、月保养及年终的大保养,并建立仪器保养和维修档案。同时要做好:检测器、液路和机械传动部分的维护 。 (实验课) 1.检测器的维护 ①采血顺利; ②防止纤维丝堵孔
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