黄芩苷PC12细胞跨膜转运的实验研究.PDFVIP

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１２Ｊｕｎ；２８（６）：８３９～４２ ·８３９· 网络出版时间：２０１２－５－１１１４：０４　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１４０４．２０１２０６．８３９＿０２４．ｈｔｍｌ 黄芩苷ＰＣ１２细胞跨膜转运的实验研究 赵　爽，雷　帆，李慧颖，王玉刚，柴玉爽，杜力军 （清华大学蛋白质科学教育部重点实验室，生命科学学院医学院药物药理学研究室，北京　１０００８４） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１２．０６．０２４ １　材料与方法 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１２）０６－０８３９－０４ １．１　主要仪器　高效液相色谱系统（ＨＰＬＣ）（Ｗａ 中国图书分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８７；Ｒ３２９．２４；Ｒ９７７．６ ｔｅｒｓ公司），含 ９９６ＰｈｏｔｏｄｉｏｄｅＡｒｒａｙＤｅｔｅｃｔｏｒ，２４１０ 摘要：目的　研究黄芩苷神经元跨膜转运的特点，部分阐释 ＲｅｆｒａｃｔｉｖｅＩｎｄｅｘＤｅｔｅｃｔｏｒ，Ｅｍｐｏｗｅｒ２色谱工作站， 黄芩苷发挥神经系统保护作用的物质性基础。方法　以 Ｒｈｅｏｄｙｎｅ７７２５ｉ手动进样器，５１５ＨＰＬＣｐｕｍｐ。Ａｇｉ ＰＣ１２细胞为研究对象，使用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、质谱 ｌｅｎｔ１２９０／６４６０液相色谱／三重四级杆质谱联用系统 （ＭＳ）法检测黄芩苷孵育细胞内的物质含量及相关代谢产 －１ （ＬＣＭＳ）（Ａｇｉｌｅｎｔ公司）。 物。结果　１００ｍｇ·Ｌ 黄芩苷给药３０ｍｉｎ后，胞内黄芩苷 浓度达峰值，８ｈ后胞内已测不出黄芩苷；在５０～４００ｍｇ· １．２　药品　黄芩苷（９８４％）由本室张陆军博士提 －１ 供。黄芩苷对照品和黄芩素对照品均购自中国药品 Ｌ 的给药浓度下，胞内黄芩苷含量与给药剂量呈正相关；抑 制剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ与Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ对黄芩苷转运有明显影响；同 生物制剂鉴定所，批号分别为：０２０７１２和０２０７１３。 时胞内检测出黄芩素、６甲氧基黄芩苷两种结构类似物。 称取黄芩苷药品，溶解于无血清 ＲＰＭＩ１６４０培 结论　黄芩苷能够浓度依赖性的跨膜入胞，此过程受相关抑 养液中，无菌条件下滤菌后，配制得浓度为１０００ｍｇ 制剂影响，并产生代谢产物。 －１ ·Ｌ 黄芩苷给药母液，ｐＨ值７２～７４，用于实验。 １．３　主要方法 关键词：黄芩苷；跨膜转运；ＰＣ１２细胞；黄芩素；６甲氧基 １．３．１　细胞培养　取生长对数期的ＰＣ１２细胞置 黄芩苷；Ｐ糖蛋白 于６ｃｍ细胞培养皿，在３７℃、含５％ ＣＯ、９０％湿度 ２ 的环境中培养，培养基为含 １０％马血清，５％胎牛血 　　现代药理研究表明，黄芩苷具有抗炎、抗菌、抗 清的ＲＰＭＩ１６４０。至细胞密度达８０％以上时进行跨 病毒、清除自由基及抗氧化、抗变态反应、抗肿瘤，神 膜转运实验。 经系统保护等药理活性，其能够通过多种途径对缺