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酶联免疫吸附法测定粮食中真菌毒素的方法学研究(摘要)
酶联免疫吸附法测定粮食中真菌毒素的方法学研究(摘要)
戚红卷 王莉莉 安代志 靳连群 刘雪林
中国人民解放军疾病预防控制所,北京,100071
目的:玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)、黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)及脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)是一类广泛污染米面、饲料及食用油等植物源性产品的真菌毒素。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)已被列为粮食行业中AFB1及DON的国家标准检测方法之一。本文采用倍肯数字化食品安全快速检测系统及配套试剂盒,对ELISA测定米面中ZEN、AFB1、及DON三种毒素的方法学进行验证。验证内容包括:标准曲线的线性、各种毒素的最低检测限、加标回收率及加标回收精密度,同时考察样品前处理方法。
材料与方法:倍肯BK-iRT(B型)数字化食品安全快速检测系统,以及ZEN、AFB1及DON ELISA快速检测试剂盒(倍肯恒业科技发展有限责任公司);大米、面粉(古船牌,购自超市); ZEN、AFB1及DON标准品(购自Fermentek公司)。样品前处理方法:称取少量粉碎的大米或面粉样本,置于离心管中,加入样品提取液,震荡混匀;离心取上清,用样品稀释液稀释并涡旋混匀,待用。检测步骤包括:试剂回温、微孔板编号、加标准品/样本、洗板、显色、上机测定及数据处理。
结果:三种毒素的标准曲线线性相关系数均大于0.99;ZEN、AFB1及DON的最低检测限分别为41 μg/kg、1.69 μg/kg及184 μg/kg,均远低于食品中真菌毒素限量国家标准;平均加标回收率在80%-100%之间;加标回收的相对标准偏差(RSD)在10.0以内;样品前处理方法统一,前处理时间大约30 min。
结论:倍肯BK-iRT(B型)数字化食品安全快速检测系统及配套试剂盒对粮食中真菌毒素检测的样品前处理简单、检测速度快、结果准确性高,具有较强的适用性。
关键词:真菌毒素;玉米赤霉烯酮;黄曲霉毒素B1;脱氧雪腐镰刀菌烯醇;酶联免疫吸附测定
作者简介:戚红卷 男 博士 助理研究员 研究方向为军队饮水与食品卫生学
Email: HYPERLINK mailto:Qihj115@163.com Qihj115@163.com
通讯作者:刘雪林 研究员
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