99mtc标记tspo新型配体cb86在肺癌与炎症中的显像研究影像医学与核医学专业论文.docx

摘要蛋白，其亲和力约为PKlll95的10倍，并且可以利用较遍及的放射性核素99mTC 摘要 蛋白，其亲和力约为PKlll95的10倍，并且可以利用较遍及的放射性核素99mTC 标记CB86从而在较便宜、普及的SPECT／CT下对肿瘤及炎症模型进行显像，故 CB86被认为是一种具有很大前景且可以显像的前体。因肺癌已居全球各类肿瘤 恶性程度的首位，故本文主要研究TSPO在肺癌细胞与炎症细胞上的表达及99mTc 标记其配体CB86在肺癌模型与炎症模型显像中的初步区别。 实验方法 首先通过Western blot、流式细胞术观察TSPO抗体与正常支气管上皮细胞 16HBe、肺癌细胞A549、NCI．H446的结合能力及在这些细胞中TSPO蛋白表达 量的情况；细胞免疫荧光及化学染色实验检测TSPO蛋白的特异性及其在细胞质 中的定位；免疫组织化学实验检测蛋白的特异性及其在肺癌组织上的表达情况； Micro．SPECT／CT显像实验观察该探针在荷瘤裸鼠中的显像效果；脂水分配系数 实验检测所标记化合物是否具有脂溶性或是水溶性：体外稳定性检测所标记化合 物在生理盐水及小鼠血清中的稳定性；细胞摄取与释放实验检测该探针与细胞中 蛋白的结合及外排情况：炎症小鼠模型生物体内分布实验检测探针在体内各器官 的摄取与滞留情况；Micro．SPECT／CT显像实验观察该探针在炎症小鼠中的显像 效果。 实验结果 Western blot、流式细胞术结果显示TSPO蛋白在正常支气管上皮细胞和不同 肺癌细胞株中均表达，但表达量不同。细胞免疫荧光及免疫化学染色实验表明 TSPO定位在细胞质。脂水分配实验结果表明9咖Tc．CB86是水溶性的。体外稳定 性实验表明，该标记物在小鼠血清和生理盐水中放置4 h后依然没有放射性分解， 证明体外稳定性很好。细胞摄取和释放实验说明，其在巨噬细胞中特异性结合很 高，并且在4h后缓慢从细胞中排出。生物分布实验数据发现它对巨噬细胞具有 特异性摄取和良好的滞留能力。对裸鼠肿瘤模型和小鼠炎症模型进行 Micro．SPECT／CT显像研究，可以看出该标记物在肿瘤模型上不摄取而在炎症上 摄取清晰可见。 结论 1．TSPO抗体可以结合正常肺细胞、肺癌细胞及组织以及巨噬细胞上TSPO II 万方数据 摘要蛋白，且这些细胞(正常肺细胞除外)上高表达TSPO。 摘要 蛋白，且这些细胞(正常肺细胞除外)上高表达TSPO。 2．我们成功制备了99mTc．CB86分子探针，99n1Tc．CB86的标记方法简单可行， 标记率较高，稳定性较好，具有良好的TSPO蛋白靶向性及特异性，是一个具有 前景的新型炎症诊断的显像剂。 关键词：TSPO；肺癌细胞；炎症；991nTc．CB86 III 万方数据 AbstractBackground Abstract Background and Purpose Tumor iS defmed once as a noncommunicable diseases like cardiovascular disease， diabetes or cllronic respiratory diseases．Although they are considered as the augment of age，urbanization and unhealthy habits，then tumor gradually eme玛es，people gradually recognized that with the augment of inflammatory factors in the human body and with the elevation of C—reactive protein levels，inflammation is also one of important factors of cancer．Many studies have demonstrated that inflammation is a clear risk factor that Can lead to cancer．The environment of Inflammation may be an important which Can cause cancer．For example，c11ronic hepatitis B，hepatitis C or liver fluke disease can increase the risk of liver cancer．Another example is the air of irritating substances，such as asbestos，PM2．5 can signif