兰花的植物组织培养2.pptVIP

中药10—1冯婷婷 国商10—1左芳 兰花的植物组织培养 春兰 兰花的组织培养 兰科(Orchidaceae) 是有花植物中最大的一个科, 约有800 属, 25 000～30 000 种, 广泛分布于全球各地。兰花是整个兰科植物的总称, 常见的有春兰、蕙兰、建兰、蝴蝶兰、石斛、卡特兰, 文心等, 其花具有极高的欣赏价值和经济价值。有些种类如天麻等则具有极高的药用价值。兰花的组织培养始于20世纪60 年代。Morel[1]采用大花蕙兰的茎尖, 在含有细胞分裂素的KC 培养基上进行培养, 茎尖分生组织膨大形成原球茎, 并分化出根和叶, 首次获得兰花无病毒小植株。目前大约已有60 余属数百种兰花可以用组织培养的方法进行繁殖。 组织培养程序与外植体选择 种子、离体胚 类原球茎 原球茎 根状茎 不定芽 根、芽 生根 小苗 愈伤组织 胚状体 丛生不定芽 诱导根 小苗 种子、胚形态建成途径 用于兰花离体繁殖的外植体材料很多, 通常选择有新芽、幼叶、茎尖等。茎尖是最早用于兰花快速繁殖的外植体。大花蕙兰(Cymbidium) 、嘉德丽亚兰(Cattleya) 、石斛兰蝴蝶兰( Phalaeanopsis) 、文心兰(Oncidium) 等首先在茎尖培养中取得成功[2]。侧芽的应用也很广泛, 一般认为带1～2 个叶原基的茎原椎成活率高, 中间部位侧芽成活率及生长率较高。但因为有的兰花只生一茎,摘取茎尖就有可能丧失母株, 因此, 人们在更大范围内寻找外植体。用叶片作外植体可以减轻或避免对母株的伤害。大多数以叶片为外植体的成功报道是取试管苗的幼叶为培养材料, 从成熟植株上取幼叶为外植体培养成功的报道不多。有研究指出: 蝴蝶兰试管苗幼叶原球茎发生率可达90%, 而成熟叶对诱导反应极弱[。这可能是由于成熟植物组织向培养基中释放高浓度的抑制生长物质, 严重影响兰花组织的存活。现已报道的蝴蝶兰外植体材料各异, 不同的外植体其诱导的效率也不同… 培养基与激素 适量的提取物，如在培养基中添加番茄汁、蛋白胨、酵母提取液、水解蛋白、苹果汁、香蕉汁等可促进兰花种子的萌发。附加香蕉泥对原球茎的增殖有明显的促进作用。香蕉匀浆物在KC培养基和White培养基是最适合原球茎增殖的添加物。水解酪蛋白对于原球茎的增殖有明显的促进作用。81。另外，胰蛋A胨、酵母提取物和KC培养基一起使用对原球茎的增殖有促进作用，但酵母提取物在White培养基上使用，对原球茎的增殖却有抑制作用 兰花的培养方式包括固体培养、半固体培养和液体培养3 种。固液相培养基对不同种属兰花的效果不同。陈振光对蕙兰属的研究中发现, 应先将外植体接种在固体培养基上, 诱导原球茎的形成, 然后在液体培养基中震荡培养, 可快速繁殖原球茎。毛碧增等对建兰的研究中发现, 用液体悬浮培养可提高原球茎的增殖率。杨玉珍等在对大花蕙兰的研究中发现, 半固体培养基( 减少琼脂用量) 最佳, 原球茎增殖最大, 色泽深绿, 健壮。吕永杰等认为, 在兰花的整个生产过程中, 可以采用3 种培养方式相结合的方法, 即利用半固体培养或液体培养进行原球茎增殖, 利用固体培养分化和生根, 增加繁殖系数, 降低污染, 减少成本, 利于大规模生产。 对蝴蝶兰的快繁中研究发现, 在蝴蝶兰的组培过程中, 不同光照时间对愈伤组织的形成所需的时间、数量、原球茎的大小、愈伤组织的颜色都有很大的影响。连续24 h 光照, 可以在短期内得到大量的直径较大的原球茎状体。在蝴蝶兰叶片诱导培养中, 光照为其他培养基反射过来的弱散射光, 光照时间为每天12 h。适当剂量的紫外光照射对兰花原球茎的增殖与分化有促进作用, 过高剂量的紫外光照射则抑制原球茎的增殖与分化。在蝴蝶兰的组培过程中, 温度过低, 形成原球茎状体所需时间较长, 生长较慢; 温度较高, 容易造成污染且易褐变, 所以选择合适的培养温度是必须的。通过研究认为, 对蝴蝶兰试管苗的培养温度为25℃ 谢谢