DNA-SIP鉴定甘蔗大豆间作土壤15N-DNA.PDFVIP

2019，38（1）:140-147 农 业 环 境 科 学 学 报 2019年1月 JournalofAgro⁃EnvironmentScience 15 苟永刚，余玲玲，许 霞，等.DNA-SIP鉴定甘蔗//大豆间作土壤 N-DNA富集位置的氮循环功能基因qPCR方法[J].农业环境科学学报,2019,38 （1）：140-147. 15 GOUYong-gang,YULing-ling,XUXia,etal.Identificationof N-DNAenrichmentsitesinDNA-SIPtorevealfunctionalgenesbyqPCRfromsugarcane- soybeanintercroppingsoil[J].JournalofAgro-EnvironmentScience,2019,38（1）：140-147. 15 DNA-SIP鉴定甘蔗//大豆间作土壤 N-DNA 富集位置的氮循环功能基因qPCR方法 1，2，3 1，2，3 1，2，3 1，2，3* 苟永刚 ，余玲玲 ，许 霞 ，王建武 （1.华南农业大学热带亚热带生态研究所，广州 510642；2.农业农村部华南热带农业环境重点实验室，广州 510642；3.华南农业 大学资源环境学院生态学系，广州 510642） 15 摘 要：为筛选有效鉴定甘蔗//大豆间作系统的稳定性同位素核酸探针技术（DNA-SIP）中超高速离心后 N-DNA富集位置的指示 功能基因，利用实时荧光定量PCR技术（qPCR），检测6个氮素循环功能基因在不同浮力密度离心液DNA中的相对丰度分布，通过 15 对氮素循环功能基因相对丰度作图分析，nif 和amoA基因在甘蔗//大豆间作和大豆单作种植模式中 N标记组与对照组基因丰度 峰发生偏移，chiA基因丰度峰仅在大豆单作种植模式下存在偏移，而nirS、nirK、nosZ等3个基因的丰度峰值在两种种植模式下均不 15 发生偏移。结果表明nif 和amoA基因可作为指示基因，能够有效鉴定甘蔗//大豆间作系统中DNA-SIP技术 N-DNA位置。 关键词：甘蔗//大豆间作；稳定性同位素核酸探针；荧光定量PCR；功能基因 中图分类号：Q508 文献标志码：A 文章编号：1672-2043（2019）01-0140-08 doi:10.11654/jaes.2018-0343 15 Identificationof N-DNAenrichmentsitesinDNA-SIPtorevealfunctionalgenesbyqPCRfromsugarcane- soybeanintercroppingsoi