造血干细胞的发育调控.ppt

（二）造血祖细胞 造血干细胞进一步分化为各种造血祖细胞 （hematopoietic progenitor cell）。 造血祖细胞是一类由造血干细胞分化而来，但失去自我更新能力的过渡性、增殖性的细胞群，过去称为定向干细胞。 造血祖细胞根据其分化能力，可分为多向祖细胞和单向祖细胞。多向祖细胞可进一步分化 为单向祖细胞。 通过体外造血细胞半固体培养证实了造血祖细胞的存在。 红细胞爆式集落形成单位 （BFU-E） 红细胞的祖细胞体外培养 红细胞集落形成单位 (CFU-E) （三）造血干／祖细胞的临床应用 造血干／祖细胞移植主要应用于： 1.血液系统恶性肿瘤，如急、慢性白血病等； 2.血液系统非恶性肿瘤性疾病，如再生障碍性贫血、异常血红蛋白病、Fanconi贫血、难治性贫血等； 3.实体肿瘤化疗后造血重建，如乳腺癌、卵巢癌、神经母细胞瘤等； 4.其他，如重症联合免疫缺陷症、自身免疫性疾病、基因治疗等。 三、造血调控 造血细胞的增殖、分化受控于不同的调控系统，以保持各种血细胞数量和质量的相对稳定。其中细胞因子的调控占重要地位。 细胞因子（cytokines）是一组基因编码的低分子量蛋白质细胞外信号分子，有的是糖蛋白，有的则不含糖基，在机体内含量极低，半衰期短，主要功能是在细胞间传递信息，从而影响造血活动。 （一）集落刺激因子类 ( colony-stimulating factors, CSFs ) 主要有以下几种： 1.红细胞生成素（erythropoietin，EPO） 刺激红系祖细胞的增殖和分化，以提高红细胞数量。 2.粒细胞集落刺激因子(G-CSF) 除促进粒系祖细胞形成集落外，G-CSF可诱导某些白血病细胞株分化成熟，激活中性粒细胞的吞噬功能。 3.粒－巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF) 除了促进中性粒细胞、单核细胞祖细胞增殖、分化 成熟外，对成熟细胞也产生作用。 4.巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF） 促进单核系祖细胞的增殖和分化，激活巨噬细胞的吞噬和分泌功能。 5.多系集落刺激因子（multi-CSF） 促进多系集落生长。 6.血小板生成素（thrombopoietin, TPO） 促进巨核细胞集落形成。 （二）白细胞介素（interleukin, IL) 白细胞介素主要是白细胞产生的信号分子，不仅在免疫系统中传递信息，同时也参与造血系统的造血调控。 （三）其它细胞因子 1.干细胞因子（stem cell factor, SCF） 又称肥大细胞生长因子 促进肥大细胞生长；协同促进造血干／祖细胞增殖、分化。 2．FLT-3配基(FLT-3 ligand, FL) 诱导处于静止期的造血干／祖细胞进人细胞周期，促进其扩增。 1．原癌基因 如：c-myc基因、ras相关基因、c-abl基因、bcl-2 基因、c-kit基因等。 （四）造血基因调控 原癌基因的编码产物可为：细胞因子、细胞因子受体、细胞内蛋白激酶、细胞内信号传递分子及转录因子等。 2. 抑癌基因 如：p53基因、WT1基因、NF1基因、DCC、Rb基因等。抑癌基因编码产物通常为细胞增殖负调节因子，抑制细胞增殖、诱导终末分化、维持基因稳定、诱导细胞凋亡等。 3. 转录因子参与信号转导的调控 对造血中基本的基因调控机制 仍存在若干悬念有待研究： （1）如何在细胞周期G1与G0之间来回转换，并保持绝大多数细胞处于G0静止状态? （2）干细胞不对称有丝分裂在基因水平上是怎样实现的? （3）干/祖细胞基因怎样调控各类受体表达，以接受造血微环境中各种正负信号的影响? （4）干细胞在基因水平如何调控向淋巴系或髓系分化?祖细胞基因如何决定分化方向?怎样保持各系之间正常恒定比例? 第三节 造血干／祖细胞体外培养技术 体内造血干／祖细胞在一个极复杂的造血微环境中增殖、分化生成血液细胞。 体外造血祖细胞培养就是在体外模拟体内的生理环境，将从机体中分离出的造血祖细胞进行培养，使之生存、增殖分化。 造血祖细胞培养的主要应用： 1）检测造血祖细胞在骨髓、外周血和脐血中的数量 2）研究体外造血祖细胞类型、特性及生理意义 3）利用人工培养条件易于严格控制的特点，研究造 血调节； 4）用于造血系统疾病发生机制，诊断、预后判断、 疗效观察及治疗药物的选择等方面的研究。 一、造血干／祖细胞体外培养的基本条件 （一）细胞培养室条件 （二）培养的支持物 （三）营养液 （四）细胞因子 （五）血清 二、造血干／祖细胞体外培养 （一）造血祖细胞集落培养： （1）分离培养细胞，制