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高压氧对大鼠脑出血后脑消肿的影响及机理研究神经外科学专业论文
中文摘要第一部分
中文摘要
第一部分
高压氧治疗对大鼠急性脑出血后脑水肿的影响
目的:
研究高压氧治疗对大鼠急性脑出血后脑水肿的影响及高压氧治疗对铁离 子和凝血酶所致脑水肿的影响。
方法:
本实验采用雄性SD大鼠,共60只,体重300,--,3509,由复旦大学实验动 物科学部提供。实验中高压氧治疗(HBO治疗)方案采用3.0标准大气压维持1 h(加压时间为15 min,减压时间为25一-,30 min)。对照组假治疗方案采用1.0标 准大气压的空气中维持1 h。
实验分为三个部分:
1.12只大鼠基底节内立体定向注射100 la l自体股动脉血制成脑出血模型, 模型制作1 h后大鼠接受HBO治疗一次(HBO组,n=6)或者假治疗一次(对 照组,n=6),脑出血模型制作24 h后大鼠断头取脑,采用干湿重法测定 脑组织水含量,另取12只大鼠基底节内立体定向注射100la l自体股动脉 血制成脑出血模型,于脑出血模型制作后1 h后给予HBO治疗,24 h和 48 h后分别再给予一次HBO治疗(HBO组,n_6),对照组大鼠(n=6)
分别在对应时间点给予假治疗,两组大鼠均于脑出血模型制作72 h后断 头取脑,采用干湿重法测定脑组织水含量。
2.12只大鼠基底节内立体定向注射鼠凝血酶(5U/50u 1生理盐水)1 h后接 受HBO治疗一次(HBO组,n=6)或者假治疗一次(对照组,n=6),24 h 后大鼠断头取脑,采用干湿重法测定脑组织水含量值。另12只大鼠基底 节内立体定向注射FeCl2(1 mM,50u1)1 h后接受HBO治疗一次(HBO 组,n-6)或者假治疗一次(对照组,n-6),24 h后断头取脑,采用干湿 重法测定脑组织水含量。
2
3.6只大鼠基底节内立体定向注射100u
3.6只大鼠基底节内立体定向注射100u 1自体股动脉全血制成脑出血模型1 h后接受HBO治疗一次(HBO组,n=3)或者假治疗一次(对照组,n=3), 脑出血模型制作24 h后处死大鼠,取血肿周围组织匀浆后采用Western blot法检测HO.1蛋白的表达情况。 另6只大鼠基底节内立体定向注射 100ul自体股动脉全血制成脑出血模型1 h后接受HBO治疗一次(HBO 组,n=3)或者假治疗一次(对照组,n=3),脑出血模型制作24h后处死 大鼠,取脑组织切片后行HO.1的免疫组织化学染色。
实验数据的统计学分析采用Stata7.0统计软件进行,脑组织水含量数据和 Western blot检测所得蛋白条带灰度像素值采用均数±标准差(X±s)表示,以 P0.05为差异具有统计学意义,两组之间均数对比采用完全随机成组设计资料的 t检验。
结果:
1.基底节脑出血1 h后给予单次HBO治疗组大鼠右侧(血肿侧)基底节 组织水含量为80.1±1.3%,显著低于对照组(81.44-1.1%,P0.05)。
2.基底节脑出血后连续三天每天一次HBO治疗组和对照组大鼠右侧(血 肿侧)基底节组织水含量分别为81.8±0.7%和82.6±O.8%,两组间无 显著性差异(尸O.05)。
3.基底节内注射凝血酶(5U/50 1.t l生理盐水)1 h后给予单次HBO治疗 组大鼠和对照组大鼠右侧(注射凝血酶侧)基底节组织水含量分别为
84.5±1.O%和84.6±1.4%,两组间无显著性差异(胗O.05)。
4.基底节内注射铁离子(Fecl2 1 mM,50p 1)24h后,后给予单次HBO 治疗组大鼠右侧(注射铁离子侧)基底节组织与皮层组织水含量分别为 84.9±0.9%和82.8±1.O%,均显著高于对照组大鼠右侧(注射铁离子 侧)基底节组织与皮层组织水含量(分别为82.1±1.9%和81.2±O.7%, P0.05)。
5.Westem blot检测显示大鼠基底节脑出血后给予单次HBO治疗组大鼠 血肿周围基底节组织内HO.1蛋白水平显著高于对照组(氏O.05),免 疫组化染色显示HBO组大鼠基底节组织内HO.1免疫活性细胞明显少
于对照组。
3
结论:1.脑出血后1
结论:
1.脑出血后1 h给予单次HBO治疗显著减轻大鼠脑出血24 h后脑水肿。 单次HBO治疗不能显著减轻凝血酶所致脑水肿且显著加重铁离子所致 脑水肿。提示单次HBO治疗减轻脑出血后24 h后脑水肿并非通过减轻 凝血酶和铁离子所致脑水肿起作用的。脑出血后单次HBO治疗减轻脑 出血后血肿周围组织内HO.1蛋白水平,这可能与脑出血后单次HBO 治疗减轻脑出血24 h后脑水肿相关。
2.脑出血后每天一次连续三天HBO治疗既未能显著减轻也未能显著加重 脑出血后72 h脑水肿,表明脑出血后急性期给予HBO治疗对脑出血后 脑水肿无显著影响,可能与出血后二至三天内血肿释放铁离子等血红蛋 白降解
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