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不同浓度的乙醇溶液对从银杏叶中 提取黄酮的影响 （叶小曼、马婕婷、周子灵、黄倩芸、吴绮琳、梁婉霞） （嘉应学院生科院，1204班） 摘 要 本实验比较了不同浓度的乙醇溶液对从银杏叶中提取黄酮的影响。以芦丁为标准样 品，建立其标准曲线的冋归方程；以乙醇体积浓度为单一因素并采用索氏提取器浸提的 方法提取黄酮，采用分光光度法检测黄酮的含量，加入显色剂，以510nm为最大吸收波 长。结果表明，当乙醇溶液的溶度为80%时黄酮捉取率最高，达0. 569%o 关键词银杏叶黄酮乙醇索氏提取器浸提 1前言 银杏叶的捉取物（GBD对扩张血管，增强血液流量及降低血压都冇良好效果, 同时具冇解痉、抗过敏及调节新陈代谢的功效。临床用GBE防治冠心病、心绞痛、脑老 化、老年性痴呆、脑功能不全、哮喘等，已收到满意效果。当而，银杏的研究和开发利 用在国内外已成为一个热点，其中又以银杏叶的开发研究为主。银杏叶萃取物中含四种 双黄酮及银杏内脂A, B, C,用其制成的保健食品和药品正在欧美风行，国内需求也日趋 增加?因此提取银杏叶的有效成分，对提取物进行分离研究很有必要。本文以不同浓度的 乙醇溶液为溶剂，采用90°C下用索氏捉取器乙醇浸捉的方法捉取银杏叶的黄酮，探讨英 浸提效杲最佳时的乙醇浓度。 2实验目的 2. 1 了解用乙醇溶液捉取银杏叶屮黄酮的原理。 2. 2学习并掌握索氏提取器的操作技术。 2. 3探讨乙醇体积浓度对从银杏叶中提取黄酮的影响。 3实验原理 黄酮的提取是根据相似相溶的原理进行的，过程实质是黄酮从植物内部向溶剂中转 移的传质过程：溶剂从溶剂主体传递到固体颗粒的表面；溶剂扩散渗入固体内部和内部 微孔隙内；黃酮溶解进入溶剂；通过固体微孔隙通道屮的溶剂扩散至表面；黄酮从固体 表面传递到溶剂主休。在这一系列步骤中，影响黄酮提取的控制因素是黄酮在所选用的 溶剂屮的溶解度大小以及向溶剂扩散的难易程度。由丁?黄酮结构和来源的不同，溶解特 性羞异也很大，因此应根据其极性和水溶性的大小來选择合适的溶剂进行提取。目前， 对昔类和极性较大的昔元，常用某些极性较大的混合溶剂（如甲醇：水二1:1）、水、甲醇、 乙醇、内?酮等进行提取，而对大多数昔元如界黄酮、黄烷酮、双氢黄酮醇等则采用苯、 乙瞇、氯仿或乙酸乙酯等极性较小的溶剂进行提取。 4实验设备 分光光度计；电了分析犬平；精宏干燥箱；高速离心机。 电热套；研钵；目筛。 5实验材料及试剂 银杏叶；浓度分别为90%、85%、80%、75%的乙醇溶液；0. 0001g/mL的芦丁标准溶 液；4%氢氧化钠溶液；5%亚硝酸钠溶液；10%硝酸铝溶液。 6实验操作步骤 6.1粗提液 清洗银杏叶，并在60°C下恒温烘干至恒重后粉碎，过60目筛。取5g置于250mL的 圆底烧瓶屮，之后往圆底烧瓶加150mL不同浓度的乙醇溶液，在电热套90°C下用索氏提 取器下浸提1. 5h,得到第一次的浸提液；再次往圆底烧瓶加50mL相应浓度的乙醇溶液在 同样的条件下浸捉30mino合并两次的浸捉液，将英移入250mL的容量瓶屮，定容。为保 证实验数据的可靠性，本实验做三次的平行试验。 6. 2粗提液除杂 用移液管从上述粗提液吸取10mL于离心管屮，3000r/min离心lOmin,取上清液， 得到最终的黄酮提取液。 6. 3标准曲线的绘制 6.3.4 0.000lg/mL芦丁标准试剂：精确称芦丁 5mg,置于50mL容量瓶中，加入适量60% 乙醇，在水浴上加热溶解，自然冷却，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。 6.3.2 取10mL容量瓶6只，分别准确吸取0.000lg/mL的标准溶液0、1.0mL、2.0mL、3.0mL、 4.0mL、5.0mL置于lOmL容量瓶屮，然后各加30%乙醇补充至5mL,加入5%亚硝酸钠 溶液0.3mL,摇匀,放置6min,再加10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,再放置6min,加4% NaOH溶液4mL,用水稀释到lOmL,放置lOmim在紫外一可见分光光度计上，在波长 绘制标准曲线，如图1 510nm处测定吸光度，以吸光度为横坐标，芦丁浓度为纵坐标,吸光度?系列1—线性（系列 510nm处测定吸光度，以吸光度为横坐标，芦丁浓度为纵坐标, 吸光度 ?系列1 —线性（系列1） 6. 4黄酮含量测定 取6. 2获得的黄酮提取液2. OmL对其稀释4倍，再从经稀释过的黄酮提取液取2mL 替代芦丁标准液，其他步骤均同6. 3. 2,得到吸光度，并由芦丁标准液冋归方程计算出黃 酮的含量。 C - N 根据捉取液屮黄酮的含量按下式可计算岀黄酮的捉取率（%） = x250^5xl00% （C为黄酮的浓度，艸为稀释浓度，％为取量） 7结果及计算 以乙醇溶液为溶剂，温度为90°C,浸提时间为2h。实验结果如下: 表1不同浓度的乙醇溶液对