蛋白质与金属配阴离子和生物大分子相互作用的共振瑞利散射光谱研究分析化学专业论文.docxVIP

目录摘要 目录 摘要 l Abstract ． ． V 第1章绪论 l 第1节蛋白质的组成、结构和生理功能 1 、| 第2节蛋白质与金属配阴离子的相互作用 l 2．1蛋白质与金属离子的相互作用 2 、‘◆ 2．2蚩白质与金属配阴离子的相互作用 2 第3节蛋白质与生物大分子的相互作用 2 3．1蛋白质与蛋白质的相互作用 3 3．2蛋白质与核酸的相互作用 6 3．3蛋白质与多糖的相互作用 9 第4节本文的主要研究内容及意义 ．．12 第2章研究报告 35 第l节[Hg(SCN)4】2。与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用 ．35 1实验部分 35 2结果与讨论 36 第2节[Hg(SCN)4】2。与血红蛋白相互作用的荧光和共振瑞利散射光谱研究 ．54 1．实验部分 54 2结果与讨论 55 第3节[Hg(SCN)4】2。对蛋白质的荧光猝灭反应及其分析应用研究 ．62 l实验部分 62 2结果与讨论 ．62 第4节[Zn(SCNh]2。与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用 ．72 l实验部分 72 2结果与讨论 73 第5节胃蛋白酶与溶菌酶相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用．．85 1．实验部分 ．85 2结果与讨论 ．85 第6节肝素钠与蛋白质相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用 。94 1实验部分 94 2结果与讨论 95 第7节肝素钠与溶菌酶相互作用的吸收、荧光和共振瑞利散射光谱 ．105 ^ l实验部分 。105 2．结果与讨论 ．105 》 至炙谢 ．1 1 3 硕士期间发表的论文 114 ， 咱， J ? A 摘要蛋白质与金属配阴离子和生物大分子相互作 摘要 蛋白质与金属配阴离子和生物大分子相互作 用的共振瑞利散射光谱研究 。I 分析化学硕士研究生 田伦富 、掌 指导教师 刘绍璞教授 摘要 本文主要研究蛋白质与[Hg(SCN)4]}、[Zn(SCN)4]扣等金属配阴离子、蛋白质 与蛋白质、蛋白质与肝素钠之间发生相互作用时对吸收光谱、荧光光谱和共振瑞 利散射光谱的影响。研究探讨了它们之间相互作用的机理、结合模式、结合位点 以及结合作用力等，并发展和建立了测定蛋白质和肝素钠的新方法。主要研究内 容如下： 1．ing(SCN)412。与蛋白质相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用 在pH 1．0-4．5的稀硫酸介质中，[Hg(SCN)4]2’配阴离子与人血清白蛋白(HSA)、 O【一糜蛋白酶(仅．Chy)、牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lyso)和丫一球蛋白“一G)等蛋白质 反应形成复合物，此时将导致共振瑞利散射(RRS)的显著增强，也能引起吸收光 谱的变化和荧光猝灭，同时还观察到圆二色(CD)光谱特征的改变。本文主要研究 [Hg(SCN)41二．蛋白质复合物的RRS光谱特征，适宜的反应条件和影响因素以及某 些分析化学性质，并以[Hg(SC如4]2-Ly$o体系为例，结合吸收、荧光和圆二色光 谱的变化，对复合物的结合位点、结合模式以及散射增强的原因进行了讨论。RRS 法具有较高的灵敏度，它对不同蛋白质的检出限在4．6—10．8 ng／mL之间，据此建 立了以[Hg(SCN)4]2‘配阴离子作探针测定人血液和尿液中蛋白质的新方法。 2．[Hg(SCN)4】2。与血红蛋白相互作用的荧光和共振瑞利散射光谱研究 在pH7．4的生理条件下，[Hg(SCN)4]2‘配阴离子能与血红蛋白(m)发生相互 作用并形成10：1的复合物，此时将导致溶液的共振瑞利散射(RRS)的显著增强 ^ 并出现相应的散射光谱，其最大散射波长位于313 nnl附近。本文根据反应产物 ’ 0 对共振光散射光谱的影响，结合[Hg(SCN)4]2。对m的荧光猝灭作用和圆二色光谱 的变化，i,-Ji,仑-][Hg(SCN)4]2’与Hb的相互作用、结合位点和结合模式。 3．[Hg(SCN)412‘对蛋白质的荧光猝灭反应及其分析应用 在pH 1．4．3．4的酸性介质中，[Hg(SCN)4]2。配阴离子可与牛血清白蛋白(BSA)、 ^r．球蛋白“．G)和血红蛋白(Hb)等蛋白质反应形成复合物，此时将引起蛋白质荧光 的猝灭。荧光猝灭程度在一定范围内与Hg(II)的浓度成线性关系，对Hg(II)测定 西南大学硕十学何论文的线性范围为0．015．1．25#g／mL，检出限(30)分别为4．4 西南大学硕十学何论文 的线性范围为0．015．1．25#g／mL，检出限(30)分别为4．4 ng／mL(BSA)、6．5 ng／mL “．G)和12．9 ng／mL(Hb)。文中研究了适宜的反应条件和影响因素，考察了共存物 质的影响，表明方法有良好的选择性，可用于红药水和乙肝疫苗中汞的测定。此 外，通过研究[