raf激酶抑制蛋白rkip特异性促进tlr3介导的炎症反应免疫学专业论文.docxVIP

逝、江太堂亟±堂焦迨塞 逝、江太堂亟±堂焦迨塞 基 逝 丹凤，平时一起交流，并在实验上给予无私的帮助；尤其感谢寿鑫和王蓓蕾同学， 谢谢你们在实验上给我的帮助。 感谢免疫所的潘婷技术员、苏晓飞技术员和洗涤间的阿姨，为我们提供了一 个良好的实验环境。感谢病理教研室的朱有法老师，在病理切片中给予的帮助。 感谢成像平台的尹伟老师，在免疫荧光实验中给予我的帮助。 最后也是最重要的，我要感谢我的家人，感谢你们一直支持着我，关心着我， 在我困惑的时候，为我提供建议，做我坚强的后盾。这一切都铭记于心，愿日后 常伴左右，回报你们的恩情! Ⅱ 万方数据 逝、江太堂亟±堂焦坠塞 逝、江太堂亟±堂焦坠塞 圭塞擅墓 Raf激酶抑制蛋白RⅪP特异性促进TLIb介导的炎症反应 浙江大学医学院 免疫学 硕士研究生 赖蓉蓉 导师 王晓健 中文摘要 炎症是威胁人类健康的危险元素之一。在固有免疫中Toll样受体可以识别外 来的各种能引起机体炎症免疫的微生物，包括细菌，病毒等。Toll样受体活化后能 引起I型干扰素和炎性因子的产生，激发机体炎症免疫反应。 RKIP作为PEBP家族的一员，在细胞增殖、分化、迁移中发挥重要功能。然 而，RKIP在炎症中的作用目前仅有全身炎症反应综合症和肠炎中有所报道。在本 研究中，我们发现RKIP正向调控TLR3诱导的炎症免疫。干扰或者敲除小鼠巨噬 细胞中RKIP的表达，显著抑制了TLR3的配体Poly(I：C)诱导的I型干扰素和炎症 因子的产生。 但不影响LPS或者CPG诱导的I型干扰素和炎症因子的产生。动 物实验也得到了一致的结果，在Poly(I：C)和D．半乳糖胺共同诱导的急性肝损伤中， RKIP缺失的小鼠表现出更低的致死率。同时，血清中I型干扰素和炎症因子的产 生明显低于野生型小鼠。机制研究发现RKIP显著促进Poly(I：C)诱导的TBKl， IRF3和MKK3／6，P38的活化，并不影响NF—Kb，ERKl／2，JNK信号通路的活化。 进一步研究发现RKIP促进TLR3触发的信号依赖其丝氨酸109位点的磷酸化。 TLR3信号通路活化诱导RKIP丝氨酸109位点的磷酸化，随后磷酸化的RKIP进 一步结合TBKl，促进TBKl和下游IRF3的活化并最终促进I型干扰素的产生。 另一方面，磷酸化的RKIP发挥一个支架蛋白的作用促进TAKl与MKK3的结合， 促进MKK3／P38的活化，进一步促进炎症因子的产生。 我们的研究结果首次揭示了RKIP在TLR3信号通路的调控作用和分子机制， 丰富了RKIP的生理功能，并为Toll样受体信号通路的研究提供了新的思路。 关键词：TLR3，RKIP，TBKl，P38MAPK，炎症，Serl09 III 万方数据 逝江盔堂亟±堂鱼途塞 逝江盔堂亟±堂鱼途塞 墓塞擅墓 Raf kinase inhibitor protein preferentially prom otes TLR3一triggered inflammation College of Medicine，Zhejiang University Immunity Candidate： Rongrong Lai Supervisor：Xiaojian Wang Abstract Raf kinase inhibitor protein(RKIP)has been demonstrated as a metastasis suppressor,and reduced RKIP expression is related to a number of metastatic cancers． But it remains elusive whether this protein has function in inflammation．Here we find that RKIP preferentially regulates TLR3．mediated immune responses in macrophage． RKIP deficiency or knockdown decreases Poly(I：C)．induced TBKl，IRF3，MKK3／6， P3 8 activation and IFN-13．TNF一0【and几一6 production without affecting the counterpart induced by LPS or CpG．RKIP—de