经口感染弓形虫小鼠小肠iga分泌细胞及抗体水平动态变化病原生物学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 山西医科大学硕士学位论文经口感染弓形虫小鼠小肠 山西医科大学硕士学位论文 经口感染弓形虫小鼠小肠IgA分泌细胞及抗体水平动态变化 摘要 目的观察经口感染弓形虫速殖子在小鼠小肠组织、实质器官内的动态分布，探讨弓 形虫病的机制；动态观察弓形虫速殖子经口感染小鼠诱导IgA分泌细胞及抗体应答，分析 两者的相关性，探讨IgA分泌细胞在抗弓形虫感染的黏膜免疫应答中的可能作用；观察STAg 鼻内免疫小鼠诱导的小肠抗体分泌细胞及抗体水平动态变化，探讨STAg鼻内免疫对小鼠小 肠黏膜不同部位IgA分泌细胞在抗弓形虫感染的黏膜免疫反应过程中的作用。 方法BALB／c小鼠96只，随机选取12只用0．5 ml／只PBS灌胃(对照组)，其余小鼠用 RH株弓形虫速殖子1x104个灌胃感染，分别于感染后2 d、4 d、6 d、8 d、10 d、12 d、14 d 随机处死12只，取十二指肠、空肠、回肠、肝脏、脾、肾、肺、心和脑做组织印片，吉． 瑞氏染色，镜检；免疫组化检测十二指肠、空肠和回肠黏膜中IgA分泌细胞数量变化，ELISA 法测定小肠液IgA及血清IgG、IgA水平。 5--6周龄BABL／c小鼠96只，随机分为免疫组和对照组。免疫组用弓形虫可溶性速殖子 抗原(STAg)20“g／只滴鼻免疫2次，间隔2周；对照组用20 1．tl PBS代替。末次免疫后1周， 灌胃攻击感染弓形虫速殖子1×104个／只。观察小鼠发病情况，于感染后6 d、7 d、8 d、9 d、 10 d和11 d，分别颈椎脱臼处死免疫组和对照组小鼠各8只。免疫组化检Nd,肠不同部位黏 膜ePIgA分泌细胞；ELISA法测定血清IgG、IgA及肠液IgA水平。 结果感染后2 d在十二指肠、空肠、回肠、肺和心，4 d在脾，6 d在肾和肝脏发现 虫体，脑内未发现虫体。十二指肠、空肠、回肠组织内虫体数量呈上升趋势，第6 d达高 峰后稍有下降。肝内虫体数量呈上升趋势，第6 d最多；脾内虫体数量在6 d达峰值后保 持较高水平；实验期间肾、肺和心内虫体数量保持较低水平阶段。 小肠IgA分泌细胞分布于小肠黏膜的固有层中，不同肠段lea分泌细胞数量的变化 规律各异。十二指肠黏膜IgA分泌细胞数量随感染后时间的推移，呈上升趋势。空肠黏 膜的IgA分泌细胞数量在感染后2～8 d升高，随后下降，至14 d下降到感染前水平。回 肠黏膜IgA分泌细胞数量在感染后2～6 d升高，随后下降，至12 d下降到低于感染前水 平。感染后，小肠液IgA水平持续增高，血清IgA无变化IgG呈增高趋势。十二指肠、 空肠和回肠黏膜的IgA分泌细胞数量与小肠液IgA的相关性分别为r=0．732(P0．001)、 r=0．116(卢0．455)和，=一0．429(PO．005)。 STAg鼻内免疫小鼠后小肠IgA分泌细胞量变化规律为：在十二指肠黏膜内随感染天 数增加逐渐增高；在空肠和回肠黏膜内随感染天数增加先上升后下降，对照组回肠黏膜内 11 d低于6 d，其它11 d都高于6 d；免疫组始终高于对照组，但无统计学差异。小肠冲 洗液IgA在第7 d降低，之后免疫组缓缓上升，对照组趋于平稳；血清IgA先下降后上升 之后又下降；血清IgG趋势稳定；免疫组始终高于对照组，各项指标组内比较均无统计 III 山西医科大学硕士学位论文学差异，组间比较差异显著 山西医科大学硕士学位论文 学差异，组间比较差异显著(PO．05)。 结论弓形虫经口感染小鼠后2 d，小肠组织出现大量速殖子：同时肺和心内有少量 速殖子；4 d在脾、6 d在肾和肝脏发现虫体：速殖子在上述组织内增殖，并形成假包囊， 脑内未发现虫体。 弓形虫经口感染小鼠可诱导十二指肠IgA分泌细胞高水平表达和小肠液中的IgA水 平增高，两者呈正相关。小肠液中高水平的IgA主要由十二指肠黏膜的IgA分泌细胞分 泌。 STAg鼻内免疫小鼠可诱导十二指肠黏膜固有层IgA分泌细胞高表达，小肠液和血清 IgA水平升高，提示STAg在抗弓形虫感染中发挥作用。 关键词；刚地弓形虫，组织内分布，抗体分泌细胞，I g A，S TA g，鼻内免疫 IV 山西医科大学硕士学位论文Research 山西医科大学硕士学位论文 Research on the distribution in tissues of mice orally infected with Toxoplasma gondii tachyzoites and the change of the specific antibody secreting cells in small intestine and the specific antibody level induced inin BALB／c AB STRA