总铁结合力测定SOPIBCT临床意义.docVIP

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总铁结合力测定SOPIBCT临床意义.doc

总铁结合力测定 版本号: 页码:第页共页 1检测原理 三价铁溶液与血清或血浆样本自动混合,使转铁蛋白的所有铁结合位点都得以饱和。在非酸性条 件(pH 8. 6)下,仅未结合的剩余的三价铁被维生素C还原成二价铁,然后与Ferene?形成蓝色复合 物。加入酸,将pH值最终调定为4.5,使得转铁蛋白的结合铁释放出来。这部分铁同样被维生素C还 原成二价铁,并与Ferene?形成更多的蓝色复合物。利用双波长(600、700 nm)终点法测出pH值 从 6变为4.5这一过程中吸光度的增加值,该增加值与转铁蛋白结合铁的浓度成比例,即与血清 或血浆样本的铁结合力成比例。 Fe+ +转铁蛋白 PH8.6 Fe* -转铁蛋白+ Fe+++ ? Fo( + Ferene? +维生素C 脱氢抗坏血酸+ 2H + Fo - Ferene复合物 (在600nm处吸收) 2标本采集与处理 1采血方法 空腹采不抗凝静脉血2?3ml。 2标本保存 标本应及时送检,在3小时内应及时分离血清,如果不能在24小时内执行测试,在2?8°C可稳定4d, 在-20°C下冰冻储存至少可稳定1个月。 3注意事项 标本应在12小时禁食后采集。标本应避免溶血、黄疸。 3试剂和设备 1试剂 采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。 1. 1试剂组成 试剂船1~3孔为维生素C 19 mM,片剂;4孔为Ferene? 0.56 mM,液体;5~6孔为三氯化铁0. 02mM, 柠檬酸0. 2Mm,液体;7孔为硫腺33 mM,乙酸盐缓冲液500 mM,液体;8孔为三疑甲基氨基甲烷缓冲 液200mM,液体。 1.2试剂准备 直接使用。 1.3试剂保存 试剂2?8°C保存,有效期内稳定。 总铁结合力测定 版本号: 页码:第页共页 3.2质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 3.3校准品 西门子校准品。 4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 4.1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 4.2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 3标本处理 以2500?3000i7min,离心6?l()min,分离血清上机测定。 4.4标本检测 4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。 4. 2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行 样品检测。 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按口期放好,保存期为7天。 5校准程序 1校准品准备和储存 直接使用,2?8°C保存。 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 3校准程序 主屏幕按 F5:PROCESS CTRL-Fl: CALIBRATION,按 enter-F2:SET-UPRUN,按项目键选择所需要校准 总铁结合力测定 版本号: 页码:第页共页 的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator.校准液货号CalibratorProduct 和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水平的值按 照由低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样品架上, 按F7: LOAD/RUN-F4: RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 1质控品准备和储存 质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-10??70°C可保存到瓶身有效期,未开启2?C可保 存90d,开启后2?LC可保存30d。 6.2质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批,每批2个浓度水平。 3质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7性能参数 本法线性范围为0 ~179.1umol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入 稀释因子后再重

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