雌激素效应环指蛋白efp在子宫内膜癌组织血管生成中的作用妇产科专业论文.docxVIP

山东大学博士学位论文符号说明 山东大学博士学位论文 符号说明 缩写词 英文全名 中文全名 Efp estrogen responsive ring finger 雌激素效应环指蛋白 protein VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 bFGF basic fibroblast growth factor 碱性成纤维细胞生长因子 GAPDH glyceraldehyde一3一phosphate dehydrogenase磷酸甘油醛脱氢酶 SERM selective estrogen receptor modulator 选择性雌激素受体调节剂 DMSo dimethyl sulphoxide 二甲基亚砜 EDTA ethylene diaminetetraacetic acid 7,--胺四乙酸 ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附法 PBS phosphate buffer solution 磷酸缓冲液 QRT-PCR quantitative reverse transcriptase 定量逆转录聚合酶链式反应 polymerase chain reaction E2 1 713一estradiol 1 713一雌二醇 40HT 4-hydroxytamoxifen 4-羟基他莫西芬 Ral raloxifene 雷洛西芬 siRNA small interfer RNA 短片段干扰RNA shRNA short hairpin RNA 短片段发夹RNA cDNA complementary DNA 互补DNA 12 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 叠丝 日期： ，争．户卯 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：I坠导师签名：么塑叁泪 期：堕!￡：竺 山东大学博士学位论文中文摘要(第一部分) 山东大学博士学位论文 中文摘要(第一部分) 不同子宫内膜癌细胞系Efp表达与雌激素及其选择性受 体调节剂作用之间的相互影响 研究生 戴红英 导师 王波教授 目的：探讨不同子宫内膜癌细胞系雌激素效应环指蛋白(Efp)表达与雌激 素及其选择性受体调节剂(SEI蝴)作用之间的相互影响。 方法：应用细胞生长试验检测1713．雌二醇(E23、4．羟基他莫西芬(40HT) 和raloxifene对子宫内膜癌细胞生长的作用，同时应用荧光定量RT．PCR、ELISA 和westem blot方法检测以上三种药物对子宫内膜癌细胞Efp和血管内皮生长因 子(VEGF)mRNA和蛋白的表达影响。并应用siRNA技术干扰Efp在子宫内 膜癌Ishikawa细胞的表达以探讨E邱基因的作用。 结果： E2和40HT可以诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖，E2(10培M) 作用24小时，Efp mRNA和蛋白表达明显升高为对照组的2倍俨0．01和 P0．05)，VEGF mRNA和蛋白表达明显升高为对照组的2．85倍职O．001)和2．10 倍(P0．05)。40HT(10。7M)p--J使Efp mRNA和蛋白表达升高为对照组的1．5倍 妒0．05)，VEGF mRNA和蛋白表达升高为对照组的1．94倍(PO．05)和1．90倍 (P0．05)。而raloxifene则不能刺激细胞的生长和Efp及VEGF的表达。E2的这 种诱导作用可部分或几乎全部被40HT和raloxifene所抑制。shRNA可较好的 干扰Efp mRNA和蛋白的表达，使Efp mRNA的表达在48小时降低约80％， 72小时也可降低约60％，同时蛋白的表达也被抑制。当Efp的表达被siRNA干 扰抑制后，E2对细胞增殖的作用减弱，E2和40HT诱导VEGF的作用也随之 减弱。雌激素也可以诱导子宫内膜癌HEC一1B细胞的增殖，同时上调 HEC．1BVEGFmRNA和蛋白水平的表达，E2(10堪M)作用24小时HEC．1B细胞 山东