高眼压大鼠外周血内皮祖细胞数量变化及辛伐他汀干预作用临床医学眼科学专业论文.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文中文摘要 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的： 1．建立大鼠高眼压模型，研究高眼压大鼠视网膜细胞凋亡随病程发展的变化情 况。 2．研究高眼压大鼠外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)数量随 病程发展变化。 3．探讨高眼压大鼠辛伐他汀干预对视网膜细胞凋亡及外周血EPCs的影响，探讨 其对视网膜改善作用，为高眼压视神经保护提供理论依据。 方法： 1．3月龄雄性Wistar大鼠，体重220～2509，共150只，随机分为①正常对照组 20只，②高眼压组100只，③激光组30只。高眼压组大鼠采用光凝角巩膜缘静 脉及巩膜上静脉方法建立大鼠高眼压模型，根据其病程不同将其分为5个亚组， 即高眼压3天、7天、3周、2月、3月组。激光组大鼠采用光凝静脉外侧，避 免光凝血管壁建立大鼠激光组模型。根据激光干预后时间长短分为3个亚组， 即激光3天、7天、3月组。测定5个亚组及激光组3个亚组大鼠外周血EPCs 数量。HE染色观察高眼压组大鼠视网膜各层结构，末端脱氧核糖核酸转移酶介 导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测视网膜凋亡细胞，免疫组织化学法测定 视网膜Bcl一2／Bax水平。 2．高眼压组大鼠100只，随机选取30只，予辛伐他汀以20mg／kg每日灌胃给药， 连续灌21日作为干预组，予20只生理盐水灌胃作为空白对照组，余50只高眼 压大鼠不服用任何药物，作为高眼压阳性对照组。干预组根据其病程长短分别 分为3个亚组，即干预组3天、7天、3周组。测定3个亚组外周血EPCs数量。 HE染色观察干预组3周组大鼠视网膜各层结构，以TUNEL法检测视网膜凋亡 细胞，免疫组织化学法测定视网膜Bcl．2／Bax水平。 结果： 1．眼压3天时达到高峰，后逐渐缓慢下降，但仍高于正常8mmHg以上，维持3 月以上。激光组3天也达高峰，后缓慢下降。外周血EPCs数量3天达高峰，后 缓慢降低，高眼压组比激光组下降更明显0O．05)。 2．高眼压大鼠视网膜HE染色和正常对照组相比，高眼压3天、7天、3周各亚 组大鼠视网膜形态未见明显差异；高眼压2月时，视网膜各层明显变薄以外核 天津医科大学硕士学位论文层最为显著，神经节细胞数量显著减少；高眼压3个月时可见视网膜变薄进一 天津医科大学硕士学位论文 层最为显著，神经节细胞数量显著减少；高眼压3个月时可见视网膜变薄进一 步加重，外核层更薄，神经节细胞数量更少，排列更加紊乱。 3．免疫组化高眼压大鼠Bcl．2／Bax阳性细胞比例和正常对照组相比，Bel．2阳性 细胞高眼压3天、7天、3周亚组未见明显差异p0．05)，高眼压2月、3月亚组 阳性细胞比例明显增高p0．05)；Bax阳性细胞高眼压3天、7天亚组未见明显 差异⑦0．05)，高眼压3周、2月、3月亚组阳性细胞比例明显增高p0．05)。高 眼压大鼠TUNEL阳性细胞比例随病程逐渐增高。 4．干预组大鼠与高眼压组相比，眼压未见明显差异(矽0．05)。外周血EPCs数量3 天达高峰，后缓慢降低，3天时高于高眼压组p0．05)，3周时也高于高眼压组 ∞O．05)。HE染色视网膜各层形态稍整齐；Bcl。2阳性细胞数未见明显差异 (矿O．05)。Bax阳性细胞比例降低，TUNEL阳性细胞比例明显降低。 结论： 1．通过光凝角巩膜缘静脉及巩膜上静脉方法可成功建立大鼠高眼压模型，高眼 压早期外周血EPCs数量达高峰，后缓慢降低。外周血EPCs数量高眼压与激 光组早期相比有统计学差异。 2．随高眼压病程延长视网膜感光细胞凋亡数量逐渐增多，神经节细胞明显减 少。 3．辛伐他汀干预可以提高高眼压早期外周血EPCs数量，使凋亡细胞数量减少， 神经节细胞剩余数量增多，可能对模型大鼠视网膜各层细胞有一定保护作 用。 关键词：高眼压模型 内皮祖细胞Bcl．2／Bax细胞凋亡辛伐他汀 Abs仃act Abs仃act Obj ective： 1．To establish a幽a1 model of elevated intraocular pressure(10P)in Wistar rats，and to study the expression of apoptotic cells in retina of elevated IOP with the extension of disease． 2．To studv the changes of endothelial progenitor cells(EPCs)in peripheral blood in rats with elevated lOP on the quantity of from with the extension of disease． 3．T