应用普通PCR与实时荧光标记PCR技术检测玉米子粒中-玉米科学.PDFVIP

玉 米 科 学2016，24(5)：43～48 JournalofMaizeSciences 文章编号：1005-0906(2016)05-0043-06 DOI:10.13597/ki.maize.science 应用普通PCR与实时荧光标记PCR技术 检测玉米子粒中转基因成分的比较 王 颖，任志莹，陈芳芳 (农业部农产品质量监督检验测试中心，沈阳 110161) 摘 要：对比普通PCR法和实时荧光标记PCR法检测玉米子粒中转基因成分的检测效率，外源基因选取调控 元件CaMV35S启动子、NOS终止子、BAR、CryIA(b)基因。普通PCR法在进行PCR扩增反应、电泳检测和凝胶成像后， 进行结果判定；实时荧光标记PCR法的结果数据由Ct值判定，在一定范围内符合要求的数据即判定有效。通过两 种方法比较，与普通PCR方法相比，实时荧光标记PCR法具有检测时间短、检测效率高、对环境造成的污染小等 特点。 关键词：玉米；子粒；转基因成分；检测效率 中图分类号：S513.037 文献标识码：A ComparisonoftheAnalysisMethodsBetweenOrdinaryPCRand Real-timeFluorescentMarkPCRTechnologytoDetect GeneticallyModifiedIngredientsinMaizeKernels WANGYing,RENZhi-ying,CHENFang-fang (AgriculturalProductsQualitySupervision,InspectionandTestCenter, theMinistryofAgriculture,Shenyang 110161,China) Abstract:UsingordinaryPCRmethodandreal-timefluorescencemarkmethodtodetectgeneticallymodified ingredientsinmaizekernels.ExogenousgeneselectionhascertaintypicalCaMV35SpromotersandNOStermina⁃ tor,BAR,CryIA(b)gene.FortheresultverdicttheordinaryPCRmethodisafterPCRamplificationreaction,electro⁃ phoresisinspectionandgelimaging.Whileforthereal-timefluorescentmarkPCRmethodtheresultdatawillbe judgedbyCtvalue,datatobedeterminedeffectivewithinacertainrangemeetingtherequirements.Bycomparing thetwomethods,real-timefluorescentmarkPCRmethodforqualitativeanalysiswithoutpreparationofstandard curve,obviouslysavingtime.Thismethodisefficientandaccurate,andlesspollutiontotheenvironment. Keywords:Maize;Kernel;Transgenicingredient;Detectionefficiency 随着转基因技术的飞速发展以及转基因生物的 世界各国已相继建立转基因标识制度，对转基 大面积种植，世界各国在分享转基因技术所带来的 因生物及其制品的检测技术提出了更高的要求。如 巨大社会、经济和生态效益的同时，对转基因生物及 何建立快速、准确、低成本的转基因检测技术