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人胰岛移植纯化技术的研究⑧ 人胰岛移植纯化技术的研究 ⑧ 论文作者签名： 指导教师签名： 论文评阅人1：严盛教授浙江大学医学院附属第一医院 评阅人2： 封光华教授浙江省杭州市第一人民医院 评阅人3： 严强主任医师浙江省湖州市中心医院 评阅人4： 评阅人5： 答辩委员会主席： 叶再元教授浙江省人民医院 委员1： 黄东胜主任医师浙江省人民医院 委员2： 吴育连教授浙江大学医学院附属第二医院 委员3： 牟一平教授浙江大学医学院附属邵逸夫医院 委员4： 李宁教授浙江中医药大学 委员5： 委员6： 答辩日期：2015年5月27日 万方数据 浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝鎏盘堂或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示谢意。 糊 虢删研 期：》噼‘月／日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝鎏盘堂有权保留并向国家有关部门或机构 送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝姿盘堂可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：论 导师签名： 曩f9 V 签字日期：少I厂年 6，月 f日 签字日期：上夕。r年G月／日 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 致谢 致谢 我要感谢郑树森院士，没有您的悉心指导、谆谆教诲，本课题不可能顺利完 成。您治学严谨、医术精湛、医德高尚，您不辞辛苦为患者解除病痛，为我国的 医学事业发展贡献自己的心力；我为有幸成为您的学术而感到十分荣耀，这也不 停地激励我向您学习! 我要真诚地感谢严盛教授，感谢您在科研临床工作生活中言传身教，在您的 耐心指导下，使我的临床与科研都有了很大的提高!感谢傅红兴老师在我的科研 工作中给予我极大的帮助，感谢厉智威师兄在科研和生活上给予我极大的支持， 感谢潘俊、陆中杰、田阳等师兄在科研实验技术上对我莫大的指导，我要感谢赵 佳聪和陈浩在本课题实验中给予的最大配合! 我要特别感谢卫生部多器官联合移植重点实验室周琳、谢海洋、鱼达、王雁、 冯晓文和宋朋红等全体老师给予我具体的实验技术指导!我要感谢陈辉、李辉、 张金花等实验人员在实验中给予我很大的支持与配合! 我要感谢王伟林、张珉、沈岩、吴健、徐骁、俞军、章茫里、吴应盛、柯庆 宏、胡振华、屠振华、张启逸、周波等全体临床科室老师在整个课题完成过程中 对我的指导与帮助! 我还要感谢我的师兄弟及同学在我的论文撰写期间给予了极大的帮助和鼓 励! 最后，我要向我的家人表示衷心的感谢，他们的理解与鼓励是我完成学业的 最大动力! 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 人胰岛移植纯化技术的研究 浙江大学医学院 外科学(普外) 硕士研究生 张耀辉 导 师 郑树森 院士 中文摘要 目的 糖尿病已经成为人类健康的严重威胁。胰岛移植在2000年Edmonton方案发 布以后，已逐渐成为一项成熟的技术，成为治疗1型糖尿病和逆转糖尿病慢性并 发症的有效方法。本实验旨在建立合适的人胰岛移植纯化方案，摸索纯化液的配 置方法，为开展临床胰岛移植奠定基础。 方法 获取成人尸体胰腺，修剪后将胰腺剪成两段，从胰管内插管灌注消化液。待 胰腺膨胀后剪成小块，在Ricordi腔室系统内循环消化，收集的组织经孵育后使用 连续密度梯度法，分别用COBE 2991细胞分离机和改良后的大瓶离心法纯化。对 纯化后的胰岛经双硫腙(DTZ)染色后计算胰岛当量(IEQ)、纯度及胰岛回收率。 结果 共实施九次胰岛分离纯化，前八次只使用COBE2991机进行分离纯化，纯化 结果不理想算作失败。第九次尝试使用改良后的大瓶离心法，其中一半胰腺消化 Ⅱ 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 产物使用COBE2991纯化，另一半采用改良后的大瓶离心法纯化。结果胰腺组织 重78．89，纯化前胰岛当量为946000 IEQ。使用COBE机纯化后的胰岛当量为 2