sox7和sox17基因启动子异常甲基化在骨髓增生异常综合征中的预后价值研究内科学专业论文.docxVIP

复 复 旦 大 学 硕 士 研 究 生 毕 业 论 文 S O X 7 和 S O X 17 基 因启 动 子 异 常 甲基 化 在 骨 髓 增 生 异 常 综 合 征 中的预 后 价 值 研 宄 院 系 ： 华 山 医 院 血 液 科 研 究 生 ： 樊 荣 导 师 ： 王 小 钦 教 授 导 师 组 成 员 ： 陈 波 斌 副 教 授 许 小 平 教 授 林 果 为 教 授 复 旦 大 学 附 属 华 山 医 院 二 零 一 二 年 四 月 目 目 录 中文 摘 要 1 英 文 摘 要 3 刖 目 6 第 一 部 分 引 言 1 5 材 料 与 方 法 … 1 6 结 果 … … 2 5 讨 论 3 2 小 结 … … 3 4 参 考 文 献 3 5 第 二 部 分 弓I 言 … … 3 7 材 料 与 方 法 … 3 8 结 果 … … 4 0 讨 论 5 2 小 结 … … 5 4 参 考 文 献 5 5 全 文 小 结 5 7 综 述 5 8 在 读 期 间 发 表 论 文 6 5 致 谢 6 7 复 旦 复 旦 大 学 硕 士 学 位 论 文 中 文 摘 要 S O X 7 和 S O X 17 基 因启 动 子 异 常 甲基 化 在 骨髓 增 生 异 常综 合 征 中的预 后 价 值 研 宄 中文 摘 要 第 一 部 分 S 0 X 7 和 S 0 X 17 基 因 启 动 子 异 常 甲基 化 抑 制 白血 病 细 胞 株 中 S 0 X 7 和 S 0 X 1 7 基 因 表 达 目的 ： 在 急 性 髓 系 白血 病 细 胞 株 T H P -1 和 骨 髓 增 生 异 常 综 合 征 （M D S ) 转 白细 胞 株 S K M -1 中 ，探 讨 去 甲基 化 药 物 5 -氮 杂 - 2- 脱 氧 胞 苷 （D A C ) 处 理 对 S 0 X 7 和 S O X 17 基 因表 达 和 细 胞 增 殖 的影 响 ；检 测 S 0 X 7 和 SO X 17 基 因在细 胞 株 中 甲基 化 状 态 ，同 时 对 甲基 化 P C R (M S P ) 技 术 的 正 确 性 进 行 验 证 。 方法 ：使用 2 、4 和 8nm ol/L D A C 处理细胞株 （T H P -1 和 SK M -1)，在 24h 、48h 和 96h 三个时 间点观察 SO X 7 和 S0 X 17 基 因表达变化 。使用 C C K -8 法检 测 4|im ol/L D A C 药 物 浓 度 对 细 胞 增 殖 的 影 响 。采 用 M SP 的 方 法 检 测 细 胞 株 S 0 X 7 和 S 0 X 17 D N A 甲 基 化 状 态 ，并 用 亚 硫 酸 盐 测 序 验 证 M S P 技 术 的 结 果 。 结 果 ：SO X 7 和 S 0 X 17 基 因在 T H P -1 和 S K M -1 细 胞株 中均有 表 达 ，使 用 DAC 处 理 后 S 0 X 7 和 S 0 X 17 基 因 m R N A 表 达 均 被 上 调 （P 0 .0 5 )，并 有 浓 度 梯 度 和 时 间梯 度 效应 ，且 T H P -I 细胞株 S0 X 7 和 S0 X 17 基 因表 达上调幅度较 SK M -1 高 。4nm ol/L D A C 处 理 细 胞 后 ，发 现 细 胞 增 殖 减 慢 （P 0 .0 5 )，T H P -1 较 S K M -1 对 药 物 反 应 敏 感 。M S P 结 果 发 现 ，S 0 X 7 和 S 0 X 17 基 因 甲基 化 D N A 存 在 于 T H P -1 和 S K M -1 细 胞 株 中 ，亚 硫 酸 盐 测 序 验 证 结 果 与 M S P 结 果 一 致 。 结 论 ： T H P -1 和 S K M -1 细 胞 株 中 存 在 S 0 X 7 和 S O X 17 基 因 的 异 常 甲基 化 ， 基 因 表 达 水 平 在 D A C 处 理 后 上 调 。亚 硫 酸 盐 测 验 验 证 了 M S P 试 验 的 正 确 性 ，表 明 可 以使 用 该 方 法 进 行 大 批 量 临 床 标 本 S 0 X 7 和 S 0 X 17 基 因 甲基 化 检 测 。 关 键 词 ： T H P -1 细 胞株 ；S K M -1 细 胞 株 ；S 0 X 7 基 因 ；S 0 X 17 基 因 ； 甲基 化 ； 甲基 化 P C R ; 5- 氮 杂