罗格列酮对环孢素a慢性肝肾毒性保护作用的实验研究内科学消化专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 漂刽性声明本人声明：所星交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 漂刽性声明 本人声明：所星交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 {乍及致褥酶戏票。尽我所翔，论文中豫将爱翔羧标注帮致{蹇|之处外， 其余部分不包含他人已发表或撰写过的研究成果。对本研究有所帮助 或做出贡献的同志筠在论文中加以致谢。 撵者签名 年 月 匿 关于学位论文使用授权说明 本人了解到郑州大学有关使用和保留学位论文的相关规定，即： 学校有权保留学位论文，允许学位论文被凌阅或借阅；学校可以公布 学位论文的全部或部分内容；可以采用复印、缩印或冀它手段保存学 位论文；学校可依据省、部有关规定送交学位论文。 俸者签名 导耀签名 年 月 |i；；| 郑州人学2004 郑州人学2004届博士研究生论文 罗格列酮对环孢素A慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究 罗格列酮对环孢素A慢性肝、肾毒性 保护作用的实验研究 博士研究生：刘章锁 导 师：李继昌刘钟明 郑州大学第一附属医院内科 郑州450052 摘 要 环孢素A(cyclosporineA，CsA)系一具有划时代意义的免疫抑制剂，其临床应 用显著改善了实体器官移植的近期存活率，尽管新型免疫抑制剂不断涌现，CsA 仍然是器官移植后免疫抑制和抗排斥反应的首选药物。但CsA也有很强的副作 用，是限制其临床应用的主要原因， CsA慢性肝、肾毒性所致的肝肾纤维化己 成为器官移植领域亟待解决的问题。罗格列酮(rosiglitazone，RGZ)属噻唑烷 二酮类(thiazolidinediones，TZDs)胰岛素增敏剂，通过激活过氧化物酶体增生物 激活受体Y(peroxisome prolifemtor-activated receptor Y，PPAR Y)而发挥作用。 PPAR v属II型核受体超家族成员，参与脂肪代谢、核酸代谢、细胞周期和细胞 分化等代谢过程，亦参与炎症和细胞外基质重塑，从而在抗炎、抑制纤维化等非 代谢性调节方面起着重要作用。因此，我们推测PPAR Y可能是防治CsA导致的 肝、。肾器质性病变的一个新靶点，到目前为止，有关RZG对CsA慢性肝、肾毒 性保护作用的研究国内外均未见报道。本实验采用低盐饮食(10w salt diet，LSD) 饲养的大鼠CsA慢性肝、肾毒性模型，观察R6Z对CsA慢性肝、肾毒性的保护作 用，并在体外分别培养肾问质成纤维(normal rat kidney，NRK)细胞和肝实质 (Buffalo Rat Liver，BRL)细胞，进一步监测RGZ对CsA细胞毒性的干预作用， 初步探讨其内在的可能机制。本实验分为以F两个部分： 郑卅l 郑卅l查堂!堕4届博士研究生论文 罗格列酮对环孢索A慢性肝、肾毒性保护作用的实验研究 第一部分罗格列酮对环孢素A慢性肾毒性 保护作用的实验研究 一 体内实验 方法 1 实验分组：健康雄性sD大鼠，低盐饮食(钠质量分数O．037％)饲养1周后 挑选体重240～2609的大鼠随机分为：1)对照组：LSD，12只；2)模型组： LSD+CsA(15mg．Kg1．d。1)，15只；3)治疗组：LSD+CsA(15mg．Kgq．d_1) +RGZ(5rag．Kg～．d。)，15只。于实验第2周每组随机收获6只大鼠，实验 第5周收获全部大鼠。 2 体重和生化指标检测：收获动物前测体重，用日立7600型全自动生化分析 仪检测血清肌酐(serum ereatinine，sCr)、尿肌酐(urine creatinine，uCr)和 血清白蛋白(Albumin，Alb)。肌酐清除率(creatinine clearance，Ccr)以 sCr、uCr及24h尿量计算。 3 肾组织病理改变以HE切片观察间质单个核细胞浸润数，并以Masson染色 观察肾问质纤维化比例。 4 免疫组织化学染色(1mmunohistoch目nistry，IHC)检测I瑾型胶原(coUageIl m， Col III)、转化生长因子一15 1(uansfomljllg growth factor-B l，TGF—B 1)、PPAR Y 和Ⅱ．SMA(Ⅱ一smoothmusclea㈧的表达。 5 反转录聚合酶链反应(reverse tmnscription-polymerase chain reaction， RT_PCR)检测TGF一15 1和PPARY的mRNA表达。 6 蛋白印迹分析(Westernblotting)检测PPARY、纤维连接蛋白(fibronectin， FN)、血管紧张素II 1型受体(Angiotensin II type 1 receptor，ATl)和磷酸 化一细胞外信号调节激酶(phosphorylation-