靶向载体介导htert反义寡核苷酸对人乳腺癌裸鼠的影响病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

郑 郑 州 大 学 2 0 09 届 硕 士 学 位 论 文 靶 向载 体 介 导 hT E R T 反 义 寡 核 普 酸 对 人 乳 腺 癌 裸 鼠的 影 响 反 义 核 酸 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 A S O D N 溶 液 20 伽 l 正 义 N G 侧 LP D 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 s O D N 制 备 的 正 义 N G 侧 LP D 混 悬 液 20 伽 1 P E 以 S O D N 高 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 P E 牲 S O D N 混 悬 液 20 伽 l P E 以 S O D N 低 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 P E 牲 s 0 D N 混 悬 液 10 伽 l LP D 高 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 LP D 混 悬 液 20 咖 1 L P D 低 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 LP D 混 悬 液 10 如 1 N G 侧 LP D 高 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 N G 侧 LP D 混 悬 液 20 伽 1 N G 侧 LP D 低 剂 量 组 : 经 尾 缘 静 脉 给 予 N G 侧 LP D 混 悬 液 10伽 1 各 实 验 组 裸 鼠 隔 天 给 药 一 次 ，连 续 给 药 三 周 。每 三 天 测 定 瘤 体 大 小 一 次 ，测 定 三 周 。 计 算 移 植 瘤 的 体 积 ， 绘 制 生 长 曲线 。 4 . 移 植 瘤 组 织 、 各 脏 器 作 常 规 病 理 切 片 ，显 微 镜 下 观 察 病 理 形 态 学 改 变 。 5 . 免 疫 组 化 技 术 检 测 移 植 瘤 h住 RT 蛋 白 以及 凋 亡 相 关 蛋 白B d 一2 ， c 一m yc 蛋 白表 达 情 况 。 6 . 采 用 半 定 量 R T 一P C R 法 检 测 瘤 组 织 h仆 R T m R N A 的 表 达 情 况 。 7 . 采 用 刊 N E L 法 原 位 检 测 各 组 肿 瘤 细 胞 凋 亡 情 况 。 8 . 统 计 学 分 析 : 实 验 数 据 用 S P S S n .0 统 计 软 件 包 进 行 统 计 学 处 理 。两 组 间 比较 采 用 t检 验 ， 多 组 间 比较 采 用 方 差 分 析 ， 数 据 用 (x 士S) 表 示 ， 。=0 .05 作 为 差 别 有 显 著 性 的 检 验 水 准 。 结 果 : 1. 经 过 一 系 列 相 关 考 察 验 证 ，证 实 N G 侧 LP D 是 形 态 规 整 的 近 球 形 复 合 物 ，平 均 粒 径 在 17 8 n m 左 右 ， 平 均 zeta 电位 近 中 性 ; 可 长 期 稳 定 存 放 ; 对 A S O D N 的 包 裹 效 果 好 ; 具 备 N G R 多 肤 的 肿 瘤 靶 向修 饰 。 2 . 体 内 分 布 实 验 结 果 显 示 : 四种 制 剂 经 静 脉 注 射 进 入 体 内后 都 部 分 地 被 肝 、 肾 、 肺 和 脾 等 脏 器 摄 取 、截 留 ，但 在 瘤 体 中 的 它 们 的 分 布 情 况 则 明 显 不 同 : A S O D N 、 P E U A S O D N 和 LP D 组 瘤 体 组 织 中 仅 能 观 察 到 微 弱 的 荧 光 ， 而 在 N G 侧 LP D 组 裸 鼠瘤 体 中 的 荧 光 强 度 则 明 显 强 于 前 三 组 ，而 且 注 射 后 1 、3 、6 小 时 三 个 时 间 点 观 察 其 荧 光 强 度 在 逐 步 增 强 ，表 明 N G 侧 LP D 复 合 物 可 以有 效 进 入 到 瘤 体 组 织 ，而 且 会 不 断 地 向 瘤 体 组 织 富 集 。 3 . 移 植 瘤 的 生 长 情 况 观 察 : 药 物 治 疗 3 周 后 ， 观 测 N G 侧 LP D 组 的 瘤 体 生 长 明 郑 郑 州 大 学 200 9 届 硕 士 学 位 论 文 靶 向载 体 介 导 h 住 R T 反 义 寡 核 普 酸 对 人 乳 腺 癌 裸 鼠的 影 响 显 受 到 抑 制 ， 与 其 它 各 组 具 有 显 著 差 异 。 4 . 免 疫 组 织 化 学 结 果 : 与 生 理 盐 水 组 相 比较 ，N G R 压P D 组 h 仆 RT 蛋 白表 达 明 显 降低 (尸 0.01 ，尸 0.05 )，高