大厂铅锌矿酸性矿坑水微生物多样性及不同培养条件对群落的影响生物工程专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 摘 要 在矿物开采过程中，由于硫化矿石的暴露，使得硫化物加速溶解， 导致大量酸性矿坑水(AMD)的产生，这些酸性矿坑水通常含有高 浓度的金属离子如铁、铜、锌、镁及非金属离子如硫、砷等，在这些 含有高浓度硫酸盐和有毒金属离子的AMD中生存着许多微生物，这 些微生物的活动进一步加剧了AMD的形成并导致环境污染。但是， AMD中生存的这些微生物对金属的生物浸出具有重要的作用。因此， 研究酸性矿坑水中的微生物群落结构及其功能活动对于微生物浸矿 和环境污染机理研究具有重要参考价值。生物冶金目前已在广泛应用 于铜、铀、镍、锌等金属矿物的生物提取，对于镍矿的生物浸出而言， 微生物的营养要求以及对镍的耐受性严重影响浸出效果。研究这些因 素对于浸矿微生物群落的影响，有利于我们在实际应用中优化浸出条 件，提高生物浸出效率。为此，本文利用16S rRNA为分子标记的 RFLP技术对广西大厂铅锌矿的微生物群落结构进行研究，并探讨不 同富集条件对浸矿微生物群落的影响。 本研究首先利用16S rRNA作为分子标记分析了大厂铅锌矿区2 个AMD样品(LS和TK)中的微生物群落结构。结果显示，其主要 分布在11个不同的系统发育分支上(Alpha-Proteobacteria， Gamma-Proteobacteria，Beta-Proteobacteria，Delta—Proteobacter泌， Actinobacteria， Acidobacteria， Clostridia，Planctomycetes， Deinococcus，Bacilli和Nitrospira)，其中Deinococcus sp．、Clostridia 和Planctomycetes只在TK中存在，Nitrospira只在LS中存在。有趣 的是，在多数AMD环境中作为优势种群存在的氧化亚铁硫杆菌 (Acidithiobacillus ferrooxidans)在TK和LS中丰度较低。 对30℃和45℃不同富集条件下浸矿微生物群落结构研究显示，富 集后的微生物主要分布在7个不同的系统发育分支上 (Beta-Proteobacteria，Alpha-Proteobacteria，Gamma-Proteobacteria， Delta-Proteobacteria，Acidobacteria，Actinobacteria，Nitrospira)，在不 同的培养条件下种群具有较大差异性，这种差异性表明了浸矿微生物 对温度及营养条件的需求不同。 本研究进一步利用PCR．RFLP技术确定镍选择压力下的微生物群 落组成。结果显示，其群落主要由Proteobacteria、Acidobacteria和 硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 Firmicutes等几大类组成。其中．4cidiphilium属和Acidithiobacillus属 丰度最高，表明其对镍具有较高的耐受能力，在镍浸出过程中可能发 挥主要作用。另外Pseudomonas属、Citrobacter属、Acidobacteria属 细菌也具较高丰度，其是否具有生物浸出功能还有待进一步研究。此 结果可为镍浸出微生物的筛选和工业应用提供理论指导。 关键词： 酸性矿坑水，微生物群落结构，限制性片段长度多态性分 析，镍抗性，系统发育分析 硕士学位论文 硕士学位论文 ABSTRACT ABATRACT In nature，thermophiles and acidophiles are oiten found in acid mine drainage or hot spring．Deep mining of metal ores results in the contamination of ground and surface waters．The most well．known water pollution associated with mining iS that which results from t11e accelerated oxidative dissolution of exposed minerals，principally sulfides， giving rise to acidic，metal