不同浓度il17a中和性抗体对cia小鼠血清中炎症细胞因子表达的影响中西医结合临床专业论文.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立 原创性声明 本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立 进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的 成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内 容外，不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对 本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明。 本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解广西中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同 意学校保留并向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许 论文被查阅和借阅。本人授权广西中医药大学可以将学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存、汇编学位论文。 (保密论文在解密后遵守此规定) 论文作者签名： 暇 r fVY绷＼ 导师签名：生塞越 日 期： 石 儿、．、j~一≯( 日 期：c2旦垡：．二：[二．牡 万方数据 不同浓度IL．17A中和性抗体对c认小型㈣症细胞因子表达的影响 不同浓度IL．17A中和性抗体对c认小型㈣ 症细胞因子表达的影响 中文摘要 目的：类风湿性关节炎作为一种骨关节相关的自身免疫性疾病， 反复发作可导致关节内软骨和骨的破坏，骨骼肌萎缩，关节功能丧失， 极易致残。目前其发病机制尚不明确。由于Thl7细胞能够介导前炎症反 应，抑制软骨基质的形成，诱导成骨细胞表达破骨细胞分化因子促进骨 侵蚀；因而通过抑制Thl7细胞的分化，可促进新的Treg细胞的生成， 诱导免疫耐受，重新建立体内免疫稳态。本实验从Thl7细胞因子的角度 研究炎性细胞因子对破骨细胞功能的调节，分析其细胞损伤过程中细胞 因子—破骨细胞的信号联系，进一步观察细胞因子阻断性抗体的作用，明 确Thl7细胞在细胞损伤作用机制。通过建立胶原诱导关节炎(CIA)小 鼠模型，探讨不同浓度的IL．17A中和性抗体对CIA小鼠血清中炎症细胞 因子表达。进一步观察细胞因子阻断性抗体的作用，明确Thl7细胞在细 胞因子一破骨细胞损伤作用机制。 方法：将48只SPF级C57BL／6雄性小鼠随机分为4组：A(空白对 照)组、B(C队+生理盐水)组、C(C认+高浓度)组、D(C认+低浓 度)组，每组12只；将酸可溶性鸡II型胶原蛋白(chicken collagen II，CCII) 溶于0．5 mol／L的醋酸溶液中，使用匀浆器充分乳化于4。C搅拌过夜，使 CCII充分溶解，然后加入等体积的氟氏完全佐剂(CFA)将其充分混匀乳 化配成浓度为2．0mg／mL的乳剂，按每只小鼠0．1mL孚L剂于尾部皮内多点免 疫，初次免疫2周后以同样方法加强免疫，诱导CIAdx鼠模型出现后在小 鼠腹腔注射细胞因子中和性抗体或生理盐水，观察2周并记录小鼠关节及 关节外表现，检测血清TNF．a、IL．17、IL．6表达水平。采用SPSS 18．0统 计软件进行处理，计量资料用均数士标准差(Xt-S)表示；采用One．way 万方数据 ANOVA分析和t检验；P0．05表示差异有统计学意义。结果：C57BL／6雄性小鼠给药48小时后尾部注射部位出现多个炎 ANOVA分析和t检验；P0．05表示差异有统计学意义。 结果：C57BL／6雄性小鼠给药48小时后尾部注射部位出现多个炎 性小溃疡，红肿明显，逐渐加重并破溃，破溃处结痂，而溃疡愈合后脱落。初 次免疫21天后开始发病，出现后足关节红肿，肤温升高，毛发失去色泽， 神志倦怠，然后蔓延到踝关节和前足，逐渐加重，表现为多发性、对称 性关节肿胀变红，部分小鼠关节强直、畸形，活动受限。A组随饲养时 间延长，体重逐渐加重。模型组体重增加明显小于正常组。C、D与B比 较TNF．a、IL．17、IL．6表达水平显著降低，并且IL一17A中和性抗体高浓 度组较低浓度组血清中炎症细胞因子表达水平降低，差异有统计学意义 (PO．05)。 结论：通过CIA小鼠腹腔内注射IL．1 7A中和抗体，结果发现 IL一17A中和抗体治疗组小鼠的足肿胀程度及功能障碍减轻，并且关节炎 平均指数评分改善，另外关节肿胀程度与足垫厚度呈正相关性，与小鼠 体重变化呈负相关性。IL．17A中和性抗体可显著降低CIA小鼠模型血清 中炎症细胞因子TNF．a、IL．17、IL．6表达水平，且以高浓度组较低浓度 组改善骨关节功能更显著，其作用机制是通过调节Thl7细胞参与介导的 细胞因子损伤免疫机制，抑制炎症细胞因子表达来实现。 关键词：IL．17A，中和性抗体，C认小鼠，细胞因子，实验动物 万方数据 Effects Effects of different concentrations of IL--17A neu