《SNT1193-2003-基因检验实验室技术要求》.pdfVIP

SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1193-2003 基因检验实验室技术要求 Generalrequirementsforthelaboratoriesfor genedetectionandidentification 2003-03-17发布 2003-09-01实施 中 华 人 民 共 和 国 .* 国家 质 量 监 督检 验 检 疫 总 局 ocICJ SN/T 1193-2003 .占J 门 . ‘‘种 月U 舌 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:国家质量监督检验检疫总局动植物检疫实验所、中华人民共和国深圳出人境检验 检疫局、中华人民共和国广州出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:朱水芳、陈红运、黄文胜、覃文、章桂明、曹际娟。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 SN/T 1193-2003 基因检验实验室技术要求 范围 本标准规定了转基因产品检测实验室总体要求、质量控制和质量保证。 本标准适用于转基因产品检测实验室的建设和质量控制。 2 术语、定义和缩 略语 下列术语、定义和缩略语适用于本标准。 2.1 转基因产品 geneticallymodifiedorganisms,GMOs;biotechnologymodifiedproducts 又叫生物技术产品。指用基因工程技术或者其他现代生物技术改变基因组构成的动物、植物、微生 物及其产品。 2.2 聚合酶链式反应 polymerasechainreaction 聚合酶链式反应，简称PCR。用一对寡核昔酸引物、四种脱氧核糖核昔酸(dNTPs)，在合适的温 度、离子条件及耐热DNA聚合酶催化下，在体外人工合成特异的模板DNA片段的过程。 2.3 实时荧光PCR real-timefluorescentPCR,kineticPCR,homogeneousPCR 在传统的PCR反应体系中，加人了扩增模板特异性的荧光标记杂交探针，同时在常规的PCR仪上 增加了荧光信号检测系统，使得PCR扩增产物的特异性及数量检测与PCR扩增同步进行。实时荧光 PCR探针有多种，常用的有分子信标(molecularbeacon),Tagman探针和杂交双探针等。 2.4 dUTP-DNA糖基化酶 UNG,Uracil-DNAglycosylase 一种特殊的DNA水解酶，它只水解掺有dUTP的DNA。此酶防污染的条件是:在PCR扩增过程 中用dUTP取代dTTP;在PCR开始前用UNG酶处理PCR扩增反应液;在碱性条件下高温950C)断 裂 DNA. 2.5 缩略语 2.5.1PCR:polymerasechainreaction,聚合酶链式反应简称PCR, 2.5.2 DNA:deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸。 2.5.3 dNTP:deoxyribonucleosidetriphosphate，脱氧核昔酸三磷酸。 2.5.4 UNG:uracil-DNAglycosylase，尿喃吮DNA-糖基化酶。 2.5.5 dATP:deoxyadenosinetriphosphate，脱氧腺昔三磷酸。 2.5.6 dTTP:deoxythymidinetriphosphate，脱氧胸昔三磷酸。 2.5.7 dUTP:deoxyuridine