《SNT1182.2-2004-禽流感微量红细胞凝集抑制试验》.pdfVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1182.2-2004 禽流感微量红细胞凝集抑制试验 Haernagglutination-inhibitiontestforavianinfluenza 2004-06-01发布 2004-12-01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家 质 量 监 督 检验 检 疫 总 局 SN/T1182.2-2004 月9 舀 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:徐海聂、薛景山、播文波、廖秀云、周思波、王小玉。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T1182.2-2004 禽流感微量红细胞凝集抑制试验 范围 本标准规定了用微量红细胞凝集抑制试验检测禽流感抗体的试验方法。 本标准适用 于禽类禽流感检疫 、疫情监测和流行病学调查。 2 试剂和材料 2 1 试荆纯度 所有化学试剂均为分析纯。 2 2 pH7.2,0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PBS) 配制方法见附录A. 2 3 红细胞泥 配制方法见 附录A 2.4 1%鸡红细胞悬浮液 将鸡红细胞泥用PBS稀释成100悬浮液 标准抗原 禽流感H5,H7,H9等标准抗原。 标准血清 禽流感H5,H7,H9等标准阳性血清和标准阴性血清。 2.7 被检血清 2,7 1 无菌采取动物血液，凝固后离心分离血清，置于4℃或一20℃保存备用。 2.7.2 除鸡外其余禽的血清需先确定是否存在非特异性凝集。有特异性凝集的，血清按下列方法进行 处理:每。.5mL血清加251.L鸡红细胞泥，轻轻振荡，静置30min,2000r/min离心2min-5min，红 细胞沉聚，取出吸附过的血清供检。 2.8 器材 架盘天平 、分析天平、离心机 、V型微量血凝板 、微 型振 荡器 、可调移液器、恒温箱等 。 操作方法 3.1 微f血凝试验 微量血凝试验见表 表 ! 禽流感微盈血凝试验 孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 一 11 12 抗原滴度Qogz) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10I{ ，‘ 对照 PBS/PL 25飞、25飞、 25飞、 25飞、 25飞、 25飞_ 25飞、 25飞、 25飞、 25飞_ 25 L251 抗原倍比稀释/kL 25) 、25J 、51225J 、25] 、25] 253、5]-25J 、25]F-253一 ~~电 PB4./kL 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 1%鸡红细胞/PL 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 作用时间及温度 室温(约20C)下静置 40min左右 }二 } 二 卜).… {... 一 )，，.一{. {。.，: 判定举例 十 州 卜- 卜-卜 十 +