微生物检验技术及其应用(han).pdf

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微生物检验技术及其应用 微生物检验技术及其应用 上海市食品药品检验所 抗生素室、食品二室 2012年 简 介 一 微生物检验技术介绍 一 二 微生物鉴定分型技术的应用 二 一、微生物检验技术介绍 检测技术的重要性 一、微生物检验技术介绍 微生物检测 微生物鉴定 传统筛选系统 革兰氏染色镜鉴 免疫凝集/免疫沉淀实验 按照标准进行 传统的生化反应鉴定 荧光免疫筛选系统 术 实时荧光定量PCR API试剂条 技 菌鉴定国际金标准 析 分 BioLumixTM实时快速 谱 微生物荧光光电检测系 半自动细菌鉴定仪 光 统 (ATB Expression ) 谱、 分子生物 BD 色 学技术 全自动细菌鉴定仪 FACSMicroCountTM (VITEK 2 ) 全自动微生物分析仪 一、微生物技术介绍 1.1 微生物的检测技术 1.2 微生物的鉴定及其分型技术 微生物的检测技术 常规培养鉴定法—显色培养基法 乳胶凝集反应 酶联免疫荧光技术 实时荧光定量PCR BioLumixTM实时快速微生物荧光光电检测系统 BD FACSMicroCountTM 全自动微生物分析仪 免疫磁珠技术 显色培养基 显色培养基检测基本原理:利用不同种属细菌 代谢所产生的酶的特异性,在培养基中加入相 应的特异性酶底物和抑制剂,当具有某特异酶 的细菌与酶底物作用时,使显色基团游离出来 附着于菌落上,形成颜色独特的菌落。根据菌 落的颜色直接对菌属(种)作出鉴定。 GB4789-2008、2010中 新技术的应用-显色培养基 沙门氏菌 志贺菌 副溶血性弧菌 O157:H7大肠埃希菌 单增李斯特菌 阪崎肠杆菌 大肠杆菌计数 显色培养基的优势 快速、简便、节省时间-大多数显色培养基只需在样品增 菌后,分离培养18~24h,即可根据菌落的颜色作出初 步的鉴定。(阴性-弃去;阳性-进一步鉴定)。 结果直观,一目了然(根据颜色判定结果)。 灵敏度高、特异性强,大大减少了后续的鉴定步骤(确 证试验)。 显色培养的缺陷 假阳性:

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